早期腦創(chuàng)傷的擴散加權成像、病理與AQP4表達的實驗研究.pdf

1、第一部分早期腦創(chuàng)傷組織的擴散加權成像與病理變化
　　目的:探討大鼠早期腦創(chuàng)傷(traumatic brain injury，TBI)后腦組織彌散加權磁共振成像(diffusion-weighted magnetic resonanceimaging，DW-MRI)、表觀擴散系數(apparent diffusion coefficient，ADC)與病理變化。
　　方法:選健康成年Wistar大鼠60只，隨機分為對照組和創(chuàng)傷

2、組(TBI)，創(chuàng)傷組按改良Feeney法制作早期腦創(chuàng)傷模型，創(chuàng)傷組按致傷后時間點再分為5個亞組—1h、3h、6h、12h、24h，每組10只。對照組除不撞擊之外其他操作同TBI組。對各組分別進行DW-MRI檢查，測量損傷區(qū)DW-MRI高信號面積(rs-DWI)及高信號面積區(qū)的ADC值，并取腦進行組織學觀察、IgG免疫組化染色半定量觀察血腦屏障(blood-brain barrier，BBB)的通透性。
　　結果:對照組DWI及腦組

3、織結構未見異常，IgG染色陰性。與對照組相比較，創(chuàng)傷組腦損傷區(qū)在1h即出現DWI高信號，高信號面積隨時間延遲逐漸增大，于6h最大，12-24h緩慢增加，與對照組相比較，各組差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。ADC值表現為1h升高、6h降低、12h再回升直至24h，與對照組比較，1h、3h、12h、24h各組的差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);6小時組的差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。組織病理觀察:損傷區(qū)腦組織在1h即出現BBB破壞

4、、紅細胞從血管內漏出、組織間隙增寬，呈現血管源性水腫，并隨時間延長逐漸加重，以創(chuàng)傷后6h明顯。創(chuàng)傷后3h開始出現細胞內水腫，表現為膠質細胞胞體增大、胞漿淡染或空泡樣變，線粒體腫脹，亦隨時間延長而逐漸加重，在6h較為明顯。創(chuàng)傷后12h除上述兩種水腫并存之外，開始出現組織壞死、炎性細胞浸潤及小膠質細胞增生，以24h明顯。IgG從1h開始呈陽性增至6h最強，維持高水平至24h，與對照組比較每組差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結

5、論:以BBB破壞為特征的血管源性水腫是早期創(chuàng)傷性腦水腫的首發(fā)水腫類型，繼后出現細胞內水腫并存的混合性水腫，隨時間延長兩種水腫逐漸加重。DWI信號變化與ADC值可反映創(chuàng)傷后腦組織的病理演變過程，當ADC值下降，對應的DWI呈高（亮）信號時提示細胞內水腫，反之，ADC圖及DWI均呈高信號時則代表血管源性水腫。
　　第二部分早期腦創(chuàng)傷非創(chuàng)傷側組織的擴散加權成像與病理變化
　　目的:探討腦創(chuàng)傷(traumatic brain inj

6、ury，TBI)后非創(chuàng)傷側腦組織彌散加權磁共振成像(diffusion-weighted magnetic resonance imaging，DW-MRI)、表觀擴散系數(apparent diffusion coefficient，ADC)與病理變化。
　　方法:選健康成年Wistar大鼠60只，隨機分為對照組和創(chuàng)傷組(TBI)，創(chuàng)傷組按改良Feeney法制作早期腦創(chuàng)傷模型，創(chuàng)傷組按致傷后時間點再分為5個亞組—1h、3h、6h

7、、12h、24h，每組10只。對照組除不撞擊之外其他操作同TBI組。各時相點分別對各組進行頭部磁共振擴散加權成像DW-MRI檢查，測量鏡像非損創(chuàng)側腦組織的ADC值，取鏡像非創(chuàng)傷側腦組織進行組織學觀察、IgG免疫組化染色半定量觀察血腦屏障(blood-brain barrier，BBB)的通透性，所得值進行統(tǒng)計學分析。
　　結果:對照組的腦組織結構及DW-MRI未見異常，IgG染色陰性。與對照組相比較，創(chuàng)傷組非創(chuàng)傷側各時相點DW-M

8、RI未見異常，ADC值1h基本正常，3h下降，6h升高，12～24h又呈下降趨勢，但各時間點與對照組比較差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。組織病理觀察:1h腦組織結構未見異常;3h出現細胞內水腫，表現為膠質細胞胞體增大、胞漿淡染或空泡樣變，線粒體腫脹。6h細胞內水腫加重，同時出現血管源性水腫，表現為BBB破壞、紅細胞從血管內漏出。12～24h細胞內水腫仍繼續(xù)加重，而血管源性水腫有緩解趨勢，并見小膠質細胞增生。IgG染色在1小時為陰性，

9、3小時弱陽性，6小時強陽性，12～24小時呈減弱趨勢，與對照組比較3h、6h、12h差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05)。
　　結論:大腦是一個高級整合中樞，當一側腦創(chuàng)傷時，非創(chuàng)傷側的腦組織有相應的病理變化，在時間上滯后于損傷側，首先出現的是細胞內水腫，然后發(fā)生血管源性水腫，隨損傷時間延長血管源性水腫有緩解趨勢，但ADC值無顯著變化，DW-MRI呈現“假性正常”現象。
　　第三部分AQP4在大鼠早期腦創(chuàng)傷組織的表達與腦水腫的關系

10、
　　目的:探討大鼠早期腦創(chuàng)傷（traumatic brain injury，TBI）后水通道蛋白-4（aquaporin-4，AQP4）的表達與腦水腫變化，尤其與血腦屏障結構破壞之間的關系。
　　方法:健康成年Wistar大鼠120只，制作早期腦創(chuàng)傷模型，數字表法隨機分為對照組和創(chuàng)傷組，創(chuàng)傷組又分:創(chuàng)傷1h組、3h組、6h組、12h組、24 h組5個亞組，每組各20只，各時相點取腦分別進行腦含水量測定、病理觀察腦水腫情況及

11、BBB結構變化，免疫組織化學及免疫印跡實驗檢測腦組織IgG和AQP4表達。
　　結果:對照組腦組織結構正常，IgG染色陰性，腦含水量及AQP4表達未見異常。與對照組相比較，創(chuàng)傷組的腦含水量從創(chuàng)傷6h后明顯增加，24h最高，與對照組相比較，6h，12h，24h組差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;IgG從創(chuàng)傷1h后即明顯增加至6h，之后維持高水平至24h，與對照組比較每組差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）;病理觀察顯示，腦創(chuàng)傷后1h即

12、出現以BBB破壞為特征的血管源性水腫，可見紅細胞從血管內漏出、組織間隙增寬，創(chuàng)傷后3h開始出現細胞內水腫，表現為膠質細胞包體增大、胞漿淡染或空泡樣變、線粒體腫脹，兩種水腫均隨時間延長而逐漸加重，在6h較為明顯。創(chuàng)傷后12h除了上述兩種水腫并存之外，開始出現組織壞死、炎性細胞浸潤及小膠質細胞增生，24h明顯。AQP4蛋白在1h開始降低，6h降至最低點，12h開始回升，呈“V”形變化，與對照組對比，3、6、24小時組差異有統(tǒng)計學意義（P＜0