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1、目的:探討葉酸對(duì)同型半胱氨酸作用下的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞基因組總甲基化水平的影響。
方法:以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,經(jīng)傳代后將其分為對(duì)照組(CON組)、實(shí)驗(yàn)組(Hcy組)及葉酸干預(yù)組(FA組)。對(duì)照組給予RPMI1640培養(yǎng)液;用含有不同濃度的同型半胱氨酸的RPMI1640培養(yǎng)液對(duì)HUVEC作用48小時(shí),經(jīng)MTT法測(cè)定不同濃度Hcy對(duì)HUVEC的增殖影響,并確定HUVEC抑制率50%時(shí)Hcy濃度(IC50),以IC50時(shí)H
2、cy濃度作為后續(xù)實(shí)驗(yàn)組;葉酸干預(yù)組給予含有0.1mm01/L濃度葉酸的RPMI1640培養(yǎng)液及IC50時(shí)Hcy濃度的RPMI1640培養(yǎng)液一起作用HUVEC48小時(shí),測(cè)定3組HUVEC的增殖情況;類似改進(jìn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)各組HUVEC的DNA甲基轉(zhuǎn)移酶活力和基因組總甲基化水平。
結(jié)果:同型半胱氨酸對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖能力有明顯的抑制作用(P<0.01),且呈明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系;葉酸可以拮抗同型半胱氨酸對(duì)
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