脂肪因子Sfrp5與肥胖及其相關代謝紊亂的相關性研究.pdf

1、背景和目的：
　　 隨著經(jīng)濟發(fā)展和人們生活水平的提高，肥胖已成為現(xiàn)代社會中最常見的營養(yǎng)障礙性疾病。肥胖是代謝性疾病如2型糖尿病的易感因素，經(jīng)常與脂肪組織的低炎癥狀態(tài)相關。脂肪組織作為內(nèi)分泌器官在這種“炎癥”狀態(tài)中發(fā)揮的作用也引起了高度關注(4)。脂肪組織中促炎細胞因子和抗炎細胞因子的分泌失調(diào)是造成人體肥胖的重要原因。
　　 分泌型卷曲相關蛋白-5(Sfrp5)是一種新鑒定的抗炎脂肪因子，是分泌卷曲相關蛋白(secrete

2、d Frizzled-related protein，SFRP)家族中的一員，它可以抑制慢性炎癥狀態(tài)，最終增加胰島素敏感性，在肥胖以及糖尿病小鼠模型中表達下調(diào)。研究表明這些蛋白的一個共同特征為擁有一個富含半胱氨酸的區(qū)域(cysteine-rich domain，CRD)，該區(qū)域與Wnt受體Frizzled蛋白的CRD具有高度同源性。因此，SFRP蛋白家族可與Frizzled蛋白受體競爭結合Wnt配體，從而對Wnt通路發(fā)揮負調(diào)控作用。Sf

3、rp5的抗炎作用是通過與脂肪組織表達的Wnt5a結合，抑制Wnt非經(jīng)典通路的下游靶點JNK的活化，進而減少炎癥因子的分泌，并拮抗胰島素受體底物-1(IRS-1)絲氨酸307磷酸化而實現(xiàn)(3，6)。脂肪細胞分化與糖及脂肪代謝、胰島素抵抗、2型糖尿病、高脂血癥等有非常密切的關系(7)。
　　 本研究的目的是以3T3-L1前脂肪細胞為研究對象，觀察3T3-L1前脂肪細胞誘導分化過程中Sfrp5表達和分泌的變化趨勢。并建立胰島素抵抗細胞

4、模型，檢測建模及羅格列酮、二甲雙胍藥物干預后Sfrp5 mRNA表達和蛋白分泌的變化。并探討非糖尿病個體血清中脂肪因子SFRP5水平與肥胖、胰島素抵抗的相關性。
　　 方法：
　　 體外培養(yǎng)3T3-L1脂肪前體細胞，應用1-甲基-3-異丁基黃嘌呤(IBMX)、地塞米松、胰島素誘導其分化，予以1μM地塞米松、100nM胰島素及10ng/l TNF-α、10μM羅格列酮及1mM_甲雙胍干預分化第6天的3T3-L1細胞過夜(2

5、4小時)。采用RT-PCR、ELISA技術檢測不同分化時間、調(diào)節(jié)因素下脂肪細胞Sfrp5 mRNA表達以及上清中蛋白分泌水平。
　　 將244例受試者按體重指數(shù)(BMI)分為對照組(77例，BMI<24kg/m2)和超重及肥胖組(170例，BMI≥24kg/m2)。ELISA法測定血清SFRP5水平。數(shù)據(jù)分析采用SPSS17.0版本，描述性結果采用均值±標準差，兩組間比較采用T檢驗；兩變量相關分析運用Pearson相關；多元逐步

6、線性回歸用于調(diào)整協(xié)變量的影響和檢驗獨立因素。在所有分析結果中P＜0.05被認為有顯著統(tǒng)計學意義。
　　 結果：
　　 (1)Sfrp5在3T3-L1前脂肪細胞無表達，隨著前脂肪細胞分化成熟，該基因轉(zhuǎn)錄、蛋白分泌水平逐漸上調(diào)，mRNA轉(zhuǎn)錄水平在第9天達到高峰(45±6倍，P＜0.001))，上清中蛋白的分泌延遲于mRNA表達，在分化第5-6天可以檢測到。
　　 (2)1μ M地塞米松、100nM胰島素及10ng/l

7、 TNF-a分別使成熟脂肪細胞的Sfrp5mRNA表達水平減少25％(P＜0.01)、43％(P＜0.01)、58％(P＜0.01)，上清中蛋白分泌水平減少10％(P＜0.05)、28％(P＜0.01)、40%(P＜0.01)、57％(P＜0.01)；
　　 (3)10μM羅格列酮、1mM=甲雙胍分別使成熟脂肪細胞的Sfrp5 mRNA表達量增加25％(P＜0.01)、28％(P＜0.01)，上清中蛋白分泌量增加20%(P＜0.

8、01)、28％(P＜0.01)。
　　 (4)在總體受試者中，肥胖組血清中Sfrp5的水平顯著低于對照組(4.46±0.72 vs4.69±0.64ng/ml，P＜0.05)。
　　 (5)血清Sfrp5水平與年齡、BMI、收縮壓、舒張壓、平均壓、尿酸無明顯相關性(P＞0.05)，血清Sfrp5水平與女/男性別比、腰臀比、總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇、空腹血糖、FINS、HOMA2-%B、HOMA2-IR之間存

9、在顯著負相關(r值分別為-0.168，-0.134，-0.132，-0.154，-0.146，-0.161，-0.312，-0.228，-0.281，P＜0.05)。血清Sfrp5與高密度脂蛋白膽固醇之間存在顯著正相關(r值為0.171，P＜0.05)。
　　 (6)經(jīng)過年齡、性別、BMI、腰臀比校正，Sfrp5仍可作為一個獨立的變量與胰島素抵抗呈顯著負相關(β=-0.425，P＜0.001)。
　　 結論：