CIK與DC細(xì)胞免疫治療在血液腫瘤中的臨床應(yīng)用.pdf

1、目的：采用自體造血干細(xì)胞移植后血液腫瘤患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞培養(yǎng)DC/CIK；觀察DC/CIK 增殖活性；應(yīng)用DC/CIK 細(xì)胞免疫治療自體造血干細(xì)胞移植后血液腫瘤患者，觀察其不良反應(yīng)。
　　 方法
　　 用血細(xì)胞分離機(jī)采集自體造血干細(xì)胞移植后血液腫瘤患者的外周血單個(gè)核細(xì)胞，經(jīng)體外誘導(dǎo)培養(yǎng)分別擴(kuò)增出DC和CIK。倒置顯微鏡下觀察DC和CIK的細(xì)胞形態(tài)。培養(yǎng)過程中培養(yǎng)后行相關(guān)病原學(xué)（細(xì)菌、霉菌）檢測(cè)。使用流式細(xì)胞儀分析培養(yǎng)

2、后的DC/CIK 相關(guān)細(xì)胞免疫表型。
　　 臨床治療將體外誘導(dǎo)培養(yǎng)的DC/CIK 經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)等鑒定和病原學(xué)檢測(cè)陰性后，DC經(jīng)皮下（雙頸部、腋下、腹股溝淋巴結(jié)共6個(gè)部位）CIK 經(jīng)靜脈回輸給患者本人?；剌斶^程中及回輸后觀察其臨床應(yīng)用的不良反應(yīng)，并監(jiān)測(cè)患者血常規(guī)、大小便常規(guī)、肝腎功能、心肌酶、心電圖等的變化。
　　 結(jié)果
　　 DC 培養(yǎng)第2天細(xì)胞體積開始變大；3天左右細(xì)胞開始出現(xiàn)變形，拉長(zhǎng)呈梭形及放射狀等各種不規(guī)

3、則的形態(tài)，部分細(xì)胞開始懸浮，貼壁細(xì)胞部分聚集成團(tuán)；培養(yǎng)7天左右，集落明顯增多，有更多的細(xì)胞處于輕貼壁狀態(tài)；培養(yǎng)9天左右大部分細(xì)胞開始懸浮，形態(tài)不規(guī)則，鏡下可見大量具有毛刺狀突起的細(xì)胞，形態(tài)不規(guī)則，為典型的DC 形態(tài)，有的細(xì)胞表面有圓形、星形及樹突樣突起。誘導(dǎo)成熟的DC 經(jīng)流式細(xì)胞儀分析顯示CD80、CD83、CD86、CD1a 等陽(yáng)性細(xì)胞比率大幅上升。CIK 培養(yǎng)第5天左右開始倍增，細(xì)胞體積明顯增大，呈現(xiàn)母細(xì)胞化，并成簇生長(zhǎng)，隨著培養(yǎng)時(shí)

4、間的延長(zhǎng)，CIK中CD3+CD56+、CD3+CD8+雙陽(yáng)性細(xì)胞的比率亦大幅度上升。
　　 DC/CIK 細(xì)胞免疫治療過程中，所有患者一般情況良好，治療過程中及治療后有部分患者出現(xiàn)低熱、乏力、皮下注射部位輕微疼痛等不良反應(yīng)，低熱持續(xù)時(shí)間大概在2-6 小時(shí)，可自行消退，所有患者均未出現(xiàn)危及生命的的并發(fā)癥和明顯的不良反應(yīng)。治療后監(jiān)測(cè)患者血常規(guī)、肝腎功能、心肌酶、心電圖均未見異常變化。
　　 結(jié)論
　　 自體造血干細(xì)胞