DC與CIK共培養(yǎng)細(xì)胞的腫瘤殺傷作用研究.pdf

1、目的：觀察樹(shù)突狀細(xì)胞(dentritic cell，DC)與同源細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞(cytokine induced killer，CIK)的共培養(yǎng)細(xì)胞(co-cultured cells by dendritic cells with cytokine induced killer，DCIK) 對(duì)分別接種了肺癌細(xì)胞株A549、肝癌細(xì)胞株BEL7404、惡性黑色素瘤細(xì)胞株A735和結(jié)腸癌細(xì)胞株Lovo的裸鼠腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒活性作用以

2、及DCIK對(duì)臨床晚期結(jié)直腸癌病人的療效。 方法：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：用正常人外周血單核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC）誘導(dǎo)培養(yǎng)DC、CIK和DCIK細(xì)胞，并分別對(duì)其進(jìn)行形態(tài)和表型分析；將肝癌細(xì)胞株BEL7404分別接種于CIK和DCIK細(xì)胞液中，培養(yǎng)后用四甲偶氮唑藍(lán)MTT法分別測(cè)定兩種細(xì)胞對(duì)腫瘤的殺傷效應(yīng)；分別接種肺癌細(xì)胞株A549、肝癌BEL7404和惡性黑色素瘤細(xì)胞株A735于裸鼠腹

3、腔內(nèi)，并在腹腔注射抗癌藥物后分成單獨(dú)化療對(duì)照組和化療加DCIK治療組，觀察用藥后20天、35天抑瘤效應(yīng)和瘤塊消失情況來(lái)比較兩組的療效差異；裸鼠尾靜脈注射接種人結(jié)腸癌細(xì)胞株Lovo，以生存天數(shù)作為觀察指標(biāo)來(lái)考察生理鹽水對(duì)照組、CIK實(shí)驗(yàn)組和DCIK實(shí)驗(yàn)組的抑瘤情況和療效。臨床應(yīng)用研究：將DCIK治療應(yīng)用于24例經(jīng)組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診為晚期的，或接受過(guò)規(guī)范化治療后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的結(jié)、直腸癌患者，檢測(cè)、對(duì)比患者治療前后血樣中CD4、CD8和CD3C

4、D56雙陽(yáng)性細(xì)胞百分比和腫瘤相關(guān)抗原的水平變化，并評(píng)價(jià)DCIK治療的臨床療效和毒副作用。 結(jié)果：DC、CIK細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)、共培養(yǎng)后，其形態(tài)和表型分析表明，DCIK細(xì)胞的增殖和CD3和CD3CD56表型細(xì)胞的增加較為明顯，釋放的細(xì)胞因子IFN-γ是CIK的3-5倍；培養(yǎng)14-21天的DCIK細(xì)胞在體外實(shí)驗(yàn)中對(duì)肝癌細(xì)胞株的殺傷活性在效靶比5:1和10:1時(shí)明顯強(qiáng)于同源的CIK細(xì)胞；在接種肺癌、肝癌和惡性黑色素瘤細(xì)胞株的裸鼠中，化療加上

5、DCIK細(xì)胞免疫治療組的療效好于單純的化療治療組，且瘤塊基本消失的比例較高，用藥后20天和 35天抑瘤效應(yīng)的比較分析顯示，化療加上DCIK細(xì)胞免疫的抑瘤效果明顯好于單純化療組（P<0.05）；CIK和DCIK細(xì)胞在沒(méi)有化療藥物時(shí)對(duì)接種于裸鼠中的結(jié)腸癌Lovo細(xì)胞顯示了強(qiáng)烈抑制作用，DCIK組裸鼠的生存天數(shù)明顯長(zhǎng)于CIK組(P<0.001)。臨床研究顯示，經(jīng)DCIK治療后，晚期結(jié)、直腸癌患者免疫細(xì)胞表型CD3CD4、CD3CD8和CD3C