CIK-DC細(xì)胞共培養(yǎng)系統(tǒng)中抗原特異性CTL細(xì)胞的誘導(dǎo)和鑒定研究.pdf

1、　　本研究的目標(biāo)是建立能誘導(dǎo)生成CTL的Her2多肽負(fù)載的CIK-DC共培養(yǎng)體系(即DCIK-P細(xì)胞)為乳腺癌高表達(dá)表皮生長因子受體蛋白Her2腫瘤疫苗的研發(fā)提供技術(shù)平臺(tái)。主要進(jìn)行了三個(gè)方面的工作：(1)建立了DCIK-P共培養(yǎng)體系。以人外周血細(xì)胞為材料，誘導(dǎo)分離出CIK和DC細(xì)胞，并用Her2負(fù)載DC，將負(fù)載Her2的DC與CIK共培養(yǎng)。(2)檢測了DCIK-P細(xì)胞對培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用。(3)利用免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)(ELISPOT)，對

2、共培養(yǎng)體系中的CTL進(jìn)行了檢測。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明負(fù)載Her2的DCIK-P細(xì)胞對于高表達(dá)相關(guān)抗原的腫瘤細(xì)胞的殺傷活性明顯增強(qiáng)，而對于低表達(dá)或不表達(dá)相關(guān)抗原的腫瘤細(xì)胞殺傷活性不能明顯提高，表明DCIK-P細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞具有抗原特異性殺傷作用。免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn)(ELISPOT)表明Her2負(fù)載的DCIK細(xì)胞，在高表達(dá)相關(guān)抗原的腫瘤細(xì)胞的刺激下產(chǎn)生的CTL細(xì)胞頻數(shù)明顯高于在低表達(dá)或不表達(dá)相關(guān)抗原的腫瘤細(xì)胞刺激下的CTL頻數(shù)。進(jìn)一步驗(yàn)證了DCI