胰島抗原特異性T細胞檢測及其應(yīng)用探討.pdf

1、目的:探討聯(lián)合谷氨酸脫羧酶(GAD65)、C肽(CP)、胰島素(INS)等全長胰島自身抗原進行CD4+T細胞-酶聯(lián)免疫斑點法(ELISPOT)檢測對自身免疫性糖尿病的診斷價值。
　　 方法:選取急性起病1型糖尿病(T1DM)患者43例，健康對照（Control）40例; ELISPOT檢測胰島自身抗原GAD65，CP，INS反應(yīng)性IFN-γ分泌性CD4+T細胞斑點數(shù)，比較不同抗原及聯(lián)合抗原T細胞檢測診斷T1DM的敏感度和特異度。

2、放射配體法檢測谷氨酸脫羧酶抗體(GADA)、蛋白酪氨酸磷酸酶抗體(IA-2A)、鋅轉(zhuǎn)運體8抗體(ZnT8A)等胰島自身抗體;放射免疫法檢測血清C肽。按照T細胞檢測和抗體檢測的結(jié)果將T1DM患者分為T+Ab+、T+Ab-、T-Ab+和T-Ab-四組，分別比較不同組別患者的體重指數(shù)(BMI)，糖化血紅蛋白(HbA1C)，空腹C肽(FCP)及餐后2hC肽(PCP)水平等臨床特征。
　　 結(jié)果:1）T1DM組43例患者中，針對GAD65

3、-T細胞反應(yīng)陽性率為21.4％(9/42)，CP-T細胞反應(yīng)陽性率為55.5％(20/36)，均高于正常對照組[vs.2.5％(1/40)和20％(8/40)]，二者均有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05); INS-T細胞反應(yīng)陽性率為2.4％(1/42)，和正常對照組無統(tǒng)計學(xué)差異。2）聯(lián)合GAD65、CP、INS三種抗原ELISPOT檢測的T細胞反應(yīng)陽性率為60.5％(26/43)，均高于GAD65和INS反應(yīng)性T細胞陽性率（均P＜0.001）

4、。3）抗體陰性的T1DM患者中有61.1％(11/18)的患者呈T細胞反應(yīng)陽性。聯(lián)合T細胞及抗體檢測的敏感度為83.7％，高于抗體檢測的58.1％及T細胞檢測的60.5％(P＜0.05)。4）與T細胞反應(yīng)陰性組比較，T細胞反應(yīng)陽性組患者FCP及PCP更低(FCP:33.5 vs.117.6,P＜0.05; PCP:63.1 vs.218.0,P＜0.01)。5)T+Ab-組患者與T-Ab+、T+Ab+組患者的BMI、FCP、PCP及Hb

5、A1C等臨床特征相似，其FCP及PCP較T-Ab-組患者更差(FCP:35.7 vs.255.7; PCP:42.2 vs.339.5，均P＜0.05)。
　　 結(jié)論:1）聯(lián)合多種抗原較單一抗原T細胞檢測可以提高自身免疫糖尿病的診斷效率;2）在部分抗體陰性T1DM患者可檢測到異常的自身反應(yīng)性T細胞，聯(lián)合抗體及T細胞檢測可提高自身免疫糖尿病的診斷陽性率;3）T細胞陽性T1DM患者較T細胞陰性患者胰島β細胞功能更差，其臨床表型與抗體