HIV-1附屬蛋白特異性細胞毒性T細胞（CTL）應(yīng)答研究.pdf

1、獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）已經(jīng)奪取了近四千萬人的生命并嚴(yán)重威脅著人類健康。高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒療法雖然在抑制HIV-1復(fù)制、免疫重建、降低AIDS相關(guān)疾病的發(fā)病率及延長HIV感染后發(fā)病時間上有良好的效果。然而由于這些抗病毒藥物價格昂貴、毒副作用大、HIV-1耐藥株的產(chǎn)生以及患者依從性不好影響了抗病毒治療的療效。因此安全有效的疫苗來控制HIV-1的流行和傳播將成為人類戰(zhàn)勝HIV的重要武器。 特異性的細胞毒性T細胞（CTL）應(yīng)答在

2、控制HIV-1和SIV復(fù)制中發(fā)揮重要作用。誘導(dǎo)機體產(chǎn)生針對HIV-1強烈的CTL應(yīng)答成為目前HIV-1疫苗研制的熱點。Nef蛋白是HIV感染早期表達的蛋白質(zhì)之一，同時也是HIV-1感染后CTL最早識別并產(chǎn)生應(yīng)答的靶蛋白。現(xiàn)已證實其能夠通過激活CD4淋巴細胞，提高病毒顆粒的感染性，增加CD4分子和MHC分子的內(nèi)吞，以及防止受感染細胞凋亡等多種途徑對HIV的復(fù)制起到重要的促進作用。Vpu通過影響新合成CD4分子向細胞膜轉(zhuǎn)運和增加CD4分子從

3、細胞膜向細胞內(nèi)內(nèi)吞來下調(diào)細胞表面的CD4。Vpr蛋白通過促進整合前復(fù)合物（PIC）從胞漿到胞核的轉(zhuǎn)運對病毒感染靜止期的細胞起到了重要作用。Vpr還可以使宿主細胞的細胞周期在G2/M期滯留，結(jié)果容易引起的細胞凋亡，甚至引起分裂細胞凋亡。Vif可以通過抑制抗病毒因子APOBEC3G的活性，增強病毒的感染性。Vif也可以使細胞周期滯留在G2/M期。 本研究選取61例HIV-1感染者/AIDS患者和10例HIV抗體陰性的健康對照者作為研

4、究對象。進行CD4細胞計數(shù)、病毒載量檢測并收集一般的臨床資料。應(yīng)用覆蓋HIV-1B、C亞型附屬蛋白（Nef、Vpu、Vpr和Vif）的142個肽段作為抗原，刺激來自研究對象的CTL產(chǎn)生γ－干擾素，采用酶聯(lián)免疫斑點吸附試驗（ELISpot）檢測，來定量測定HIV-1附屬蛋白特異性CD8+T細胞應(yīng)答，對中國人群HIV-1附屬蛋白特異性CD8+T細胞應(yīng)答反應(yīng)進行了較全面的研究。 本研究發(fā)現(xiàn)無論對HIV-1B 亞型還是HIV-1C亞型附

5、屬蛋白都能產(chǎn)生特異性CTL 應(yīng)答，特別是Nef區(qū)蛋白的反應(yīng)頻率和累積應(yīng)答強度都較高（P<0.001），B、C亞型間的應(yīng)答頻率和累積應(yīng)答強度都無顯著差別（P>0.05），其免疫優(yōu)勢區(qū)也大致相同，并篩選出了附屬蛋白區(qū)的免疫優(yōu)勢區(qū)。附屬蛋白特異性的累積CTL應(yīng)答強度將近達到總應(yīng)答的21％。這些結(jié)果表明盡管HIV-1附屬蛋白的序列較短，但它們在誘導(dǎo)特異性的CTL應(yīng)答中發(fā)揮了重要作用。 總之，本課題初步研究了HIV-1附屬蛋白特異性的CT