去卵巢大鼠（OVX）腦缺血后大腦海馬區(qū)β淀粉樣蛋白的表達.pdf

1、目的： 老年性癡呆(Alzheimer's disease，AD)是一種常見的神經(jīng)系統(tǒng)變性性疾病，以β-淀粉樣蛋白(AB)為主的神經(jīng)炎性斑(SPS)胞外沉積和神經(jīng)元內(nèi)神經(jīng)纖維纏結(jié)(NFTS)是AD的特征性病理改變。臨床癥狀主要表現(xiàn)為進行性記憶和語言能力喪失及識別能力障礙，隨著我國人均壽命逐漸延長進入老齡化社會，幾十年來該病的發(fā)病率逐漸上升，給社會和家庭帶來沉重負擔(dān)。該病病因不清，治療效果不佳，近年來，對AD和腦缺血、雌激素減少之

2、間關(guān)系進行了探討，其基本觀念是AD的發(fā)病必須是老化和腦缺血同時出現(xiàn)，雌激素減少，可以加重這一過程。本實驗通過去卵巢大鼠(OVX)腦缺血后大腦海馬區(qū)β-淀粉樣蛋白表達的研究，探討雌激素減少、腦缺血在老年性癡呆中是否具有致病作用。 方法： 健康雌性SD大鼠60只，隨機分為4組，A1組(OVX+2VO模型組)15只10％水合氯醛(0.35ml/kg)腹腔麻醉，切除大鼠雙側(cè)卵巢；術(shù)后3周10％水合氯醛(0.35ml/kg)腹腔麻

3、醉，結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈。A2組(OVX模型組)15只切除大鼠雙側(cè)卵巢；3周后假手術(shù)結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈。B1組(2VO模型組)15只假手術(shù)切除雙側(cè)卵巢；3周后結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈。B2組(SHAM假手術(shù)組)15只假手術(shù)切除雙側(cè)卵巢；3周后假手術(shù)結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈。第2次手術(shù)完成后，在第3天、7天、14天，分別取4組大鼠各5只，用10％水合氯醛(0.35ml/kg)腹腔麻醉后開腹，經(jīng)升主動脈插管，取心臟血2ml分離血清置冰箱保存測血清雌激素水平。經(jīng)心

4、灌注后，取腦額極后后7-10mm，置于4％多聚甲醛固定液中固定，30％蔗糖浸泡至下沉，浸蠟，包埋，在蠟塊中心處連續(xù)切兩張6μm厚冠狀切片，進行Aβ免疫組織化學(xué)染色，按照常規(guī)SABC法進行。將封固好的切片置于光鏡下觀察，參照Paxions鼠腦圖譜，觀察海馬區(qū)內(nèi)Aβ陽性聚集，用CMIAS多功能真彩色病理圖像分析系統(tǒng)測量海馬區(qū)內(nèi)Aβ陽性染色光密度值。數(shù)據(jù)以均值加減標準差表示，所有數(shù)據(jù)采用SPSS統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，兩兩比較用t檢驗，P＜0.

5、05為有統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)果： OVX+2VO、OVX兩組大鼠血清E2水平顯著低于2VO、SHAM組(P＜0.01)。大鼠海馬區(qū)Aβ抗體染色后光鏡下觀察測量：OVX+2VO模型組大鼠3天時海馬區(qū)開始有Aβ聚集，3天、7天、14天時Aβ陽性染色光密度值逐漸增高(P＜0.05)；OVX+2VO模型組3天、7天、14天3個時段分別同其它3組同時段相比Aβ陽性染色光密度值顯著增高(P＜0.01)。OVX模型組14天Aβ陽性染色光密

6、度值同3天、7天相比增高(P＜0.05)，OVX模型組Aβ陽性染色光密度值3天、7天時段同假手術(shù)組相比無增高，14天時Aβ陽性染色光密度值同假手術(shù)組相比顯著增高(P＜0.01)。2VO模型組3天時大鼠海馬內(nèi)開始有Aβ聚集，3天、7天、14天時Aβ陽性染色光密度值逐漸增高(P＜0.01)；3天、7天、14天3個時段同假手術(shù)組相比Aβ陽性染色光密度值顯著增高(P＜0.01)。 結(jié)論： 長期雌激素缺乏可以使β-淀粉樣蛋白在大鼠