調(diào)節(jié)性B 細(xì)胞在天皰瘡發(fā)病中的作用.pdf

1、目的：天皰瘡是一嚴(yán)重的自身免疫性大皰性皮膚、粘膜疾病。以往認(rèn)為僅自身抗體發(fā)揮了致病作用，但近年來研究表明多種效應(yīng)細(xì)胞及效應(yīng)分子共同參與了疾病的發(fā)生、發(fā)展。其中B 細(xì)胞在自身免疫性疾病中除了正向致病作用外，其負(fù)向調(diào)節(jié)功能被越來越多的揭示。為了更好地探討調(diào)節(jié)性B 細(xì)胞（Breg）在天皰瘡發(fā)病中可能的調(diào)節(jié)機(jī)制，本研究對天皰瘡患者外周血Breg 的比例及其細(xì)胞因子的產(chǎn)生進(jìn)行檢測，并對Breg在Th 細(xì)胞活化中的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行研究，揭示了天皰瘡的免

2、疫介導(dǎo)機(jī)制。
　　 方法：臨床上收集天皰瘡患者55 例，根據(jù)不同臨床表型、嚴(yán)重程度進(jìn)行分類。采用ELISA 法檢測患者血清中特異性抗Dsg1、Dsg3 抗體滴度、亞型，分析其與疾病活動的相關(guān)性。以CD19+CD24hiCD38hi 作為Breg 標(biāo)記，流式檢測48 例患者(PV+PF)及20 例正常人外周血中Breg 占CD19+B 細(xì)胞的比例，觀察不同嚴(yán)重程度患者Breg 比例的變化趨勢、并與抗體、抗體亞型進(jìn)行相關(guān)性分析；采用

3、實時定量熒光PCR 方法檢測6 例急性期天皰瘡患者（均為PV）和4例正常人外周血Breg 的細(xì)胞因子IL-6、IL-10、TGF-β表達(dá)水平；并通過FACS 分選出11 例急性期天皰瘡患者（8 例PV、3 例PF）和7 例正常人的Breg、CD4+T 細(xì)胞，分別行CD4+T 和Breg 的培養(yǎng)，觀察Breg對CD4+T 細(xì)胞功能的影響。
　　 結(jié)果：對55 名天皰瘡患者進(jìn)行臨床研究后發(fā)現(xiàn)，其臨床表型與自身抗體種類密切相關(guān)；特異性

4、抗體滴度和疾病的嚴(yán)重度不甚平行，但抗體亞型卻和疾病活動相關(guān)，急性期患者(PV+PF)以IgG4 亞型抗體為主，IgG4/IgG1 比值>1, PNP 患者則表現(xiàn)為特殊的抗體亞型，以IgG1 亞型抗體為主，IgG4/IgG1 出現(xiàn)倒置。天皰瘡患者（PV+PF）外周血中Breg 占CD19+B 細(xì)胞的比例高于正常對照，以急性期最為明顯，且急性期中重度患者該比例明顯高于輕度患者；Breg 比例與抗Dsg1 抗體亞型IgG4 以及IgG4/Ig

5、G1 的比值均呈正相關(guān)；分選后的Breg 細(xì)胞因子IL-10 的表達(dá)顯著升高，但I(xiàn)L-6、TGF-β水平無顯著變化；正常人中外周血分選出的Breg 能有效抑制Th1 型細(xì)胞活化，而患者的Breg 則無明顯的抑制作用。
　　 結(jié)論：本研究從B 細(xì)胞的雙向免疫調(diào)節(jié)作用入手，一方面反應(yīng)性B細(xì)胞產(chǎn)生致病性抗體，抗體亞型與疾病活動密切相關(guān)，發(fā)揮正向免疫調(diào)節(jié)作用；另一方面，Breg 產(chǎn)生抑制性細(xì)胞因子如IL-10，發(fā)揮負(fù)向免疫調(diào)節(jié)作用，在天