高碘誘導(dǎo)的自身免疫甲狀腺炎小鼠發(fā)病中調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的變化.pdf

1、目的
　　 自身免疫甲狀腺炎(Auto immune thyroiditis,AIT)是典型的器官特異性自身免疫性疾病,AIT患者體內(nèi)存在免疫耐受障礙,免疫應(yīng)答調(diào)節(jié)受損以致免疫應(yīng)答和炎癥反應(yīng)過(guò)強(qiáng)而造成甲狀腺細(xì)胞的自身免疫性損傷,發(fā)病機(jī)制與細(xì)胞免疫和體液免疫異常均相關(guān)。B細(xì)胞主要通過(guò)呈遞抗原和產(chǎn)生抗體參與體液免疫,其分化為不同亞群參與免疫反應(yīng)的正向免疫效應(yīng)與負(fù)向免疫調(diào)節(jié)過(guò)程。新近研究發(fā)現(xiàn)存在一種新的B細(xì)胞亞群——調(diào)節(jié)性B細(xì)胞(re

2、gulatory B cell,Breg),其與B細(xì)胞在自身免疫病中通常扮演致病性角色不同,Bregs通過(guò)分泌白細(xì)胞介素-10(IL-10)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)等抑制性細(xì)胞因子介導(dǎo)免疫耐受,發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用[3]。本研究通過(guò)高碘誘發(fā)NOD.H-2h4小鼠發(fā)生自身免疫甲狀腺炎,觀察此動(dòng)物模型脾臟Bregs及相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)量的變化,探討B(tài)regs在AIT發(fā)生、發(fā)展中的免疫調(diào)節(jié)作用。
　　 方法
　　 選取4周齡

3、NOD.H-2h4雌性小鼠40只,體重20克左右,隨機(jī)分為2個(gè)對(duì)照組(給予無(wú)菌雙蒸水)和2個(gè)高碘飲水組(給予含0.005%碘化鈉水,相當(dāng)于小鼠正常碘攝入量的100倍),每組10只。于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后第10、20周麻醉分別處死1個(gè)對(duì)照組和1個(gè)高碘飲水組。留取各組NOD.H-2h4小鼠甲狀腺,HE染色觀察淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)情況并進(jìn)行甲狀腺炎癥程度評(píng)分;酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定各組小鼠血清甲狀腺球蛋白抗體(TgAb)水平;制備各組NOD.H-2

4、h4小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞懸液,免疫熒光染色流式細(xì)胞儀分析CD1dhiCD5+CD19+調(diào)節(jié)性B細(xì)胞比例的變化;提取小鼠脾細(xì)胞總RNA,實(shí)時(shí)定量RT-PCR檢測(cè)調(diào)節(jié)性B細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-10(IL-10)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)mRNA的表達(dá)水平。應(yīng)用SPSS17.0軟件處理和分析數(shù)據(jù)。
　　 結(jié)果
　　 NOD.H-2h4小鼠飲高碘水10周及20周后甲狀腺組織有不同程度的淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),甲狀腺炎的發(fā)生率、甲

5、狀腺炎癥程度組織學(xué)評(píng)分、血清TgAb水平均明顯高于飲用無(wú)菌雙蒸水的對(duì)照組(P＜0.05);發(fā)生AIT的小鼠脾臟B細(xì)胞中CD1dhiCD5+CD19+Bregs所占比例和脾組織及脾細(xì)胞中IL-10mRNA、TGF-βmRNA表達(dá)量較對(duì)照組明顯降低(P＜0.05)。隨著高碘飲水時(shí)間的延長(zhǎng),甲狀腺炎的發(fā)生率及甲狀腺炎癥程度組織學(xué)評(píng)分呈升高趨勢(shì),而脾臟Bregs表達(dá)則呈降低趨勢(shì)。
　　 結(jié)論
　　 高碘誘導(dǎo)的發(fā)生AIT的NOD.