碘致nod.h2h4小鼠自身免疫性甲狀腺炎micrornas的表達(dá)變化

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文碘致NOD.H--2h4小鼠自身免疫性甲狀腺炎microRNAs的表達(dá)變化姓名：趙姝潔申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：臨床醫(yī)學(xué)；內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：李玉姝201204控制基因表達(dá)的重要分子。近來研究發(fā)現(xiàn)，m i c r o R N A s 不儀參與細(xì)胞的多種功能，如發(fā)育、成熟、分化及凋亡，特別是對(duì)重要的免疫細(xì)胞——_ T 細(xì)胞具有貫穿始終的調(diào)控作用。學(xué)者們已經(jīng)在多種自身免疫疾病中發(fā)現(xiàn)了異常表達(dá)的m i R N A ，但是A

2、I T與m i R N A 之間的關(guān)系還未見有作者報(bào)道。本研究檢測(cè)m i R ．1 5 5 ，m i R ．1 4 6 ，m i R ．3 2 6在高碘誘發(fā)甲狀腺炎的小鼠脾臟的C D 4 + T 細(xì)胞及甲狀腺組織中的表達(dá)量變化。探討m i R ．1 5 5 ，m i R ．1 4 6 ，m i R ．3 2 6 在A I T 發(fā)生、發(fā)展中的免疫調(diào)節(jié)作用。方法選取4 周齡N O D ．H ．2 h 4 雌性小鼠3 4 只，體重2 0 克左

3、右，隨機(jī)分為2 個(gè)對(duì)照組( 給予無菌雙蒸水) 和2 個(gè)高碘飲水組( 給予含0 ．0 5 ％碘化鈉溶液，相當(dāng)于小鼠正常碘攝入量的1 0 0 0 倍，1 0 0 0 H I ) ，1 2 周對(duì)照組6 只，2 0 周對(duì)照組8 只，高碘飲水組各l O 只。于實(shí)驗(yàn)開始后第1 2 、2 0 周麻醉分別處死1 個(gè)高碘飲水組小鼠和相應(yīng)對(duì)照組小鼠。1 2 周組留取各組N O D ．H 一2 h 4 小鼠甲狀腺，H E 染色觀察淋巴細(xì)胞浸潤情況并進(jìn)行甲狀腺

4、炎癥程度評(píng)分；常規(guī)制備各小鼠脾臟單個(gè)核細(xì)胞懸液，使用M A C S 磁珠分選C D 4 + T 細(xì)胞；免疫熒光染色流式細(xì)胞儀分析分選比率；試劑盒提取C D 4 + T細(xì)胞s m a l lR N A ，實(shí)時(shí)定量l m P C R 檢測(cè)m i R N A ．1 5 5 ，m i R N A ．1 4 6 ，m i R N A 一3 2 6 的相對(duì)表達(dá)水平。2 0 周組留取各組N O D ．H ．2 h 4 小鼠單側(cè)甲狀腺，H E 染色觀察

5、淋巴細(xì)胞浸潤情況并進(jìn)行甲狀腺炎癥程度評(píng)分；另一側(cè)甲狀腺，提取甲狀腺組織s m a l lR N A ，實(shí)時(shí)定量R T - P C R 檢測(cè)m i R N A ．1 5 5 ，m i R N A ．1 4 6 ，m i R N A ．2 3 6 的表達(dá)水平。應(yīng)用S P S S 1 7 ．0 軟件處理和分析數(shù)據(jù)。兩組間m i R N A 平均水平的比較采用兩獨(dú)立樣本t 檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)a 均取O ．0 5 。結(jié) 果N O D ．H ．2 h