人中性粒細(xì)胞防御素對(duì)自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎的診斷價(jià)值.pdf

1、背景和目的：
　　自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎(SpontaneousBacterialPeritonitis，SBP)是肝硬化腹水患者最常見(jiàn)的并發(fā)癥。肝硬化患者幾乎均有免疫功能低下，肝硬化失代償期肝臟細(xì)胞大量破壞，肝臟解毒功能減退，同時(shí)因門(mén)靜脈高壓導(dǎo)致腸道及脾臟淤血，腸道粘膜屏障功能破壞，腸道血管通透性增高以及腸道運(yùn)動(dòng)障礙、免疫功能低下等，腸道菌群失調(diào)，致病菌群過(guò)度增殖及發(fā)生定植轉(zhuǎn)移，是發(fā)生SBP的重要原因。SBP的發(fā)生會(huì)加劇病情的進(jìn)展，

2、如不能及時(shí)控制可迅速發(fā)展為感染性休克和肝、腎功能衰竭，誘發(fā)肝性腦病，嚴(yán)重危及患者的生命[1]。因此對(duì)SBP進(jìn)行及時(shí)和正確的診斷對(duì)肝硬化并腹水患者的治療顯得至關(guān)重要。
　　目前，臨床上SBP的診斷主要以腹水常規(guī)和腹水培養(yǎng)作為標(biāo)準(zhǔn)，以血常規(guī)作為重要的參考指標(biāo)，但由于受腹水稀釋、腹膜炎癥反應(yīng)能力等因素的影響，在很多情況下腹水常規(guī)及血常規(guī)并不能完全反映腹腔真實(shí)的感染狀態(tài)，而且腹水培養(yǎng)花費(fèi)的時(shí)間長(zhǎng)，陽(yáng)性率低，其診斷具有一定的局限性，為此我們

3、進(jìn)行了血漿人中性粒細(xì)胞防御素(humanneutrophilpeptides，HNP)水平在不同人群中的觀察研究，并與血常規(guī)、降鈣素原(Procalcitonin，PCT)和C-反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein，CRP)等炎性指標(biāo)進(jìn)行比較，以期探討HNP在SBP中的診斷價(jià)值。
　　方法：
　　1、研究對(duì)象為2011年7月至2012年6月在山東大學(xué)附屬濟(jì)南市傳染病醫(yī)院住院治療的肝硬化并腹水患者共77例，其中乙型肝炎

4、67例，丙型肝炎8例，酒精性肝病2例。SBP組45例，其中男性32例，女性13例，年齡34～67(39.3±15.7)歲;非SBP組32例，其中男性21例，女性11例，年齡32～63(35.7±14.9)歲。兩組患者的性別比、年齡和病因?qū)W診斷差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。健康對(duì)照組共28名，其中男性16名，女性12名，年齡37～59(47.5±10.6)歲。SBP的診斷符合以下標(biāo)準(zhǔn)[2]:(1)不同程度的發(fā)熱，有腹痛，腹部壓痛及反跳痛等

5、腹膜刺激征表現(xiàn)及感染征象;(2)腹水常規(guī)檢查:腹水中性粒細(xì)胞＞0.25×109/L;(3)腹水培養(yǎng)陽(yáng)性。滿足(1)、(3)條，或者是滿足第(2)條同時(shí)除外結(jié)核、其他繼發(fā)性腹膜炎及腫瘤，即診斷為SBP。同時(shí)收集來(lái)院健康體檢者為健康對(duì)照組。
　　2、觀察指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)方法主要觀察指標(biāo)為血漿HNP，對(duì)照指標(biāo)為外周血白細(xì)胞總數(shù)(WBC)、中性粒細(xì)胞比率(Neutrophilsratio，N)以及血漿PCT和CRP。以確診為SBP的當(dāng)日或次日采

6、集外周靜脈血標(biāo)本進(jìn)行相關(guān)指標(biāo)的檢測(cè)。血常規(guī)及中性粒細(xì)胞比率采用全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，EDTA抗凝管真空抽血2ml混勻后及時(shí)送檢;PCT、CRP、HNP的標(biāo)本均用肝素作為抗凝劑采集，混勻20分鐘后，2000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，取上清液，將標(biāo)本-20℃保存，待標(biāo)本集齊后統(tǒng)一進(jìn)行試驗(yàn)。HNP采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)，試劑盒購(gòu)自上海慧嘉公司;PCT檢測(cè)采用PCT半定量快速檢測(cè)試劑盒（購(gòu)自德國(guó)Brahms公司），分＜0.5ng/ml、0.5-2.

7、0ng/ml、2.0-10ng/ml和＞10ng/ml4個(gè)濃度梯度，＞0.5ng/ml為陽(yáng)性閾值[3]。CRP檢測(cè)采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法，儀器購(gòu)自德國(guó)拜耳公司。
　　3、統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件做單因素分析;計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((x)±s)表示，采用單因素方差分析和q檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn)，多個(gè)實(shí)驗(yàn)組間的兩兩比較采用x2分割法。采用受試者工作曲線(Receiveroperatingcharacterist

8、iccurveROC)下面積(Theareaunderthecurve,AUC)來(lái)衡量幾種檢測(cè)指標(biāo)的診斷意義，曲線下面積采用z檢驗(yàn)。當(dāng)AUC＞0.9時(shí)有較高的診斷準(zhǔn)確性，當(dāng)AUC在0.7～0.9之間時(shí)診斷準(zhǔn)確性中等，當(dāng)AUC在0.5～0.7之間時(shí)診斷準(zhǔn)確性較低，當(dāng)AUC＜0.5時(shí)無(wú)診斷價(jià)值。通過(guò)ROC曲線來(lái)確定最佳診斷域值，并計(jì)算域值的敏感度和特異度，從而計(jì)算出Youden指數(shù)。P＜0.05認(rèn)為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：

9、>　　1、SBP組、非SBP組、對(duì)照組外周血白細(xì)胞總數(shù)[(6.01±2.25)×109/L，、(4.85±1.94)×109/L、(5.49±1.76)×109/L]與中性粒細(xì)胞比率(70.70％±10.42％，、68.20％±8.97％、69.50％±8.69％)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=2.91vs3、07,P＞0.05);
　　2、三組血漿HNP值比較F=4.05，P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且SBP組[(17.66±

10、6.40)ng/ml]明顯高于非SBP組[(9.99±3.33)ng/ml]與對(duì)照組[(8.92±2.30)ng/ml]，q值分別為3.20，3.52，P值均＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;
　　3、三組CRP值比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=33.02，P＜0.05)，且SBP組[(31.32±18.65)mg/L]及非SBP組[(15.08±9.95)ng/ml]與對(duì)照組[(5.96±2.91)ng/ml]比較q值分別為11.03和3

11、.69，P值均＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4、PCT陽(yáng)性率SBP組為62.2％，與非SBP組25.0％和對(duì)照組10.0％比較x2值分別為10.41，15.40，P值均＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　5、HNP的曲線下面積(AUC)最高，PCT次之，CRP最低，分別為0.719，0，707，0.629。當(dāng)HNP、PCT和CRP的截?cái)嘀捣謩e為10ng/ml、0.5ng/ml和8mg/L時(shí)，其對(duì)SBP診斷的敏感度分別為7

12、1.1％、62.2％和73.3％，特異度分別為71.9％、75.0％和56.3％，Youden指數(shù)分別為0.430、0.372和0.296。
　　結(jié)論：
　　1、血漿HNP含量在肝硬化腹水患者發(fā)生SBP時(shí)較非SBP及健康對(duì)照組明顯升高，，對(duì)SBP的診斷敏感度為71.7％，特異度為:71.9％，AUC為0.719，顯示對(duì)SBP的早期診斷有較大的參考價(jià)值。
　　2.肝硬化患者因脾功能亢進(jìn)及機(jī)體反應(yīng)能力等因素的限制，當(dāng)發(fā)生輕

13、癥SBP時(shí)，外周血白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比率往往不能早期、準(zhǔn)確的反應(yīng)出來(lái)，限制了其對(duì)SBP的早期診斷。
　　3、血漿CRP濃度在肝硬化SBP組和非SBP組均較健康對(duì)照組明顯升高，顯示診斷SBP的敏感度較高為:73.3％，特異度稍差為:56.3％。
　　4、血漿PCT陽(yáng)性率SBP組較非SBP組及健康對(duì)照組均高，對(duì)SBP的診斷價(jià)值，敏感度和特異度均較高，分別為62.2％和75.0％，對(duì)SBP的診斷價(jià)值較大。
　　5、當(dāng)臨床