固定化核酸酶P1酶膜反應(yīng)器的研究與應(yīng)用.pdf

1、酶膜反應(yīng)器作為新興的多學(xué)科交叉研究領(lǐng)域，將生物酶的高催化活性與分離膜的選擇透過(guò)性結(jié)合起來(lái)，實(shí)現(xiàn)了反應(yīng)與分離的同步進(jìn)行，具有很高的效率。本論文采用課題組自主研發(fā)的耐高溫特種工程樹(shù)脂——含二氮雜萘酮結(jié)構(gòu)聚芳醚砜酮(PPESK)制備的中空纖維超濾膜設(shè)計(jì)了固定化酶膜反應(yīng)器，對(duì)其進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，并對(duì)其在5'-核苷酸生產(chǎn)中的應(yīng)用進(jìn)行了考察。主要內(nèi)容如下： 1.實(shí)驗(yàn)考察了固定化核酸酶P1的部分酶學(xué)性質(zhì)。結(jié)果表明：固定化核酸酶P1的最適pH值

2、為5.4，比游離酶的最適pH值提高了0.2個(gè)單位，而且固定化酶有更好的pH穩(wěn)定性；固定化酶的最適溫度為70℃，比游離酶提高了10℃，而且熱穩(wěn)定性也有大幅度的提高，70℃溫浴4h仍有30％以上的酶活力；一定劑量的zn2+對(duì)核酸酶P1的酶活性有激活或強(qiáng)化的作用，但如果劑量過(guò)大會(huì)引起酶的失活。 2.研究了固定化條件的優(yōu)選，考察了酶液濃度、明膠濃度、戊二醛濃度、固定化時(shí)間、固定化溫度等因素對(duì)固定化酶活力的影響，通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得出固定化的

3、最佳條件是：酶液濃度為200mg·L-1，pH為5.2，固定溫度為35℃，固定時(shí)間為30min。 3.研究了IEMR的酶解工藝?？疾炝朔磻?yīng)溫度、時(shí)間、壓力、pH值、Zn2+濃度、底物濃度、載酶量等因素對(duì)IEMR工作性能的影響。結(jié)果表明，在65℃、表壓0.1MPa、pH為5.4、Zn2+濃度為0.0006mol·L-1、底物濃度為2％、載酶量為200mg·L-1的條件下工作5小時(shí)IEMR的催化水解轉(zhuǎn)化率可達(dá)85％左右。 4