定量檢測端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶mRNA在肝癌中的表達水平及其對預后的影響.pdf

1、背景與目的 原發(fā)性肝癌(Primary liver cancer，PLC)是中國最常見的惡性腫瘤之一，在腫瘤死亡原因中占第2位。目前，手術(shù)切除仍然是肝癌首選的治療手段，但是即使是根治性切除，其術(shù)后復發(fā)率仍很高，生存率仍較低。如何判斷肝癌預后是目前亟需解決的問題。肝癌預后的判斷在于判斷肝癌的生物學特性。研究表明端粒酶與惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(human telomerase reverse transcript

2、ase，hTERT)是端粒酶合成的限速酶，其表達與端粒酶活性呈正相關(guān)。研究表明，端粒酶表達陽性的惡性腫瘤預后差。hTERTmRNA的檢測方法較端粒酶活性檢測方便且精確。目前在肝癌中定量檢測hTERTmRNA的報道較少見，本研究采用熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)結(jié)合Taqman MGB probe技術(shù)，利用絕對定量的方法研究肝癌及癌旁組織中hTERTmRNA的表達，探討定量檢測hTERT mRNA水平與肝癌術(shù)后復發(fā)與長期生存的關(guān)系。 方

3、法： 選取中山大學腫瘤防治中心2002年1月～2003年12月間手術(shù)切除的術(shù)后病理確診為肝細胞癌的30例病例的肝癌組織和癌旁組織，用實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)結(jié)合Taqman MGB探針法定量檢測其hTERTmRNA的表達水平，利用統(tǒng)計學分析其與肝癌術(shù)后復發(fā)與長期的關(guān)系。 結(jié)果： hTERTmRNA在肝癌和癌旁組織中均可探測到表達，hTERT mRNA在癌組織中表達的中位數(shù)為523(3.5～9220)copie

4、s/ug；在癌旁組織中表達的中位數(shù)為153(12.9～1760)copies/ug。hTERTmRNA在癌組織和癌旁組織中的配對檢驗具有顯著差異，hTERTmRNA在肝癌組織中的表達明顯高于癌旁組織的表達(z=-4.001，p<0.0001)；hTERTmRNA在肝癌組織和癌旁組織中的表達與性別、年齡、乙肝病毒感染、病理分級無明顯相關(guān)性；hTERTmRNA在1年內(nèi)復發(fā)的病例與1年內(nèi)未復發(fā)的病例的肝癌組織的配對檢驗無統(tǒng)計學差異(z=-1.

5、420，p=0.158)；hTERTmRNA在1年內(nèi)復發(fā)的病例的癌旁組織中的表達比1年未復發(fā)的病例的癌旁組織中的表達高，且有明顯統(tǒng)計學差異(z=-2,518，p=0.011)：3年生存的患者與死亡的患者間癌和癌旁hTERTmRNA的表達水平?jīng)]有明顯的統(tǒng)計學意義(p>0.05)。 結(jié)論： 熒光定量逆轉(zhuǎn)錄PCR法一種敏感有效的檢測hTERTmRNA的方法；hTERTmRNA在肝癌組織中表達較癌旁組織中的表達明顯高；hTERT