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文檔簡介
1、內蒙古農業(yè)大學碩士學位論文雞內源性類J亞群禽白血病病毒gp85基因的克隆及表達姓名:童淑梅申請學位級別:碩士專業(yè):基礎獸醫(yī)學指導教師:趙振華楊玉瑩20070501CloningandExpressionofChickenEndogenousSubgroupJAvianLeukosisgp85一likeGene^bstraol:AvianleukosisVI‘RUSsubgroupJ㈣J)wasfirstisolatedin1989and
2、identifiedasanewsubgroupofavianleukosisvirusmenvgeneofALvJisveryunique。hasverylowhomologytOotherALVsubgroups,howeverexhibits97%identitytOEAVHPsequfncewhichisexistedinthenormalchickensgenomeALVJmostcausesmyeloidleukosis,w
3、hileotherexogenous^£飴mainlyinducelymphoidleukosis力培previousresearchdatashowedthatenVgeneiscloselyrelatedtotheALVoncogenicityEnvgenecodevirusenvelopeglycoprotein,includingSurfaceglycoproteinUnit(gp85genecode)andtransmembr
4、aneprotein(gp37genecode)PrimerscorrespondingtothenucleotidesequencesflankingtheJsubgroupavianleu—cosisvlrus(ALVJ)gP85genewereusedtoamplifytheintactendogenousgp85一likege—nefromuninfectedSPFembryo、Meatchickembryo、Liangfeng
5、huachickembryoandNativechickThefourdifferentvarietyendogenousALVJgp85likeelementsdemons廿ated952%~98。6%identicaltoDFIcellLinereported,949%~976%identicaitostrain:HPRS103AIVJ885%~907%identicaltostrainIMC10200ALvJForresearch
6、indepthendogenousALVJ99851ikeexpresswhatparticipanta醴on也】ringinfectingm”J,itpro—videsafavorablefoundation一msystemOfBactoBacwastriumphantlyconstructed,andexpressedALVJgp851ikeproteinALVJgp85一likeproteinexpressedwasidentif
7、iedbymono—clonalantibodyJE9tOALVJgp85protein,byIFAandWesternblotdetecfingThemolecularweightofALVJgp851ikeproteinwas35KD船themolecularweightofALVJgp85protein(36KD)notglycosylatedTheresearchrevealstheactivestateofALMJgp851i
8、keinnormalconditionandtheimmunologycolmnortllessanddiscrepancywithexogenousvirusgp85proteinexpressed吼erecombinedbaculovirusconstructedmaybemultipledlargelyandCanobtainlargenumbersofenvelopeproteinwithbiologyactivitywhich
9、canbethedetectionantigenofELISAinsteadofALVJgp85proteininthefuture,designedtodetecttheinfectionofALVJvirusTheresearchiSverysignificanttorealizetheevolutionofretrovirusandthemechanismofitsinfecti∞Keywords:Avianleukosisvir
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