組織型轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(tTG)在自發(fā)性高血壓大鼠心肌壁內(nèi)小冠脈重構(gòu)中的作用.pdf

1、目的: 研究組織型轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(tTG)在心肌壁內(nèi)小冠脈(SIMCA)重構(gòu)中的影響和可能的機(jī)制。 方法: 12周齡雄性SHR分為高血壓組(SHR)、tTG抑制劑胱胺(Cys)治療組(分為CysH、CysL兩個亞組，分別予胱胺112mg/kg·d、28mg/kg·d腹腔注射)，另設(shè)年齡、性別配對的WKY大鼠為對照組，每組均為8只。每隔2周測量各組大鼠的體重、心率和尾動脈壓。治療12周后檢查超聲心動圖和血流動力學(xué)并終

2、止實(shí)驗(yàn)。抽取左室腔內(nèi)血液約3毫升，離心分離血漿，采用貝克曼庫爾特全自動生化分析儀以比色法測定甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)和肌酐(CREA)，氧化電極法測定葡萄糖(GLU)以及酶學(xué)電極法測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的含量。左室心肌切片經(jīng)HE、苦味酸一天狼猩紅染色(Sirus-red)、彈力纖維和膠原纖維的雙重染色(P/VB法)，計算機(jī)輔助成像系統(tǒng)計算SIMCA的血管壁面積(WA)、血管腔面積(LA)和血管壁面積百分比(％wA)。免疫

3、組化染色SIMCA以檢測tTG、tTG活性表達(dá)的標(biāo)志物N-ε-γ谷氨?；嚢彼峤宦?lián)蛋白(GGEL)在各組大鼠的SIMCA上的表達(dá)程度。Western Blot法檢測左室心肌組織中tTG的蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果: 1.CysH、CysL組治療SHR12周，兩劑量組的尾動脈收縮壓(SBP)比SHR組的SBP略低，但無明顯差異，均顯著高于WKY組(P<0.01)。 2.SHR組與WKY組比，SIMCA的WA增大，LA減小

4、，％WA明顯增大(10-69μm組：66±1.8 vs43±1.2；70-150μm組：57±2.2 vs42+1.1，P均<0.01)。CysH、CysL組SIMCA的％WA較SHR組明顯降低(10-69μm組：CysH55±2.1，CysL58±1.9 vs SHR66±1.8；70-150μm組：CysH49±1.1，CysL52±1.8 vs SHR57±2.2，P均<0.01)，CysH組對SHR的SIMCA重構(gòu)的改善程度大于

5、CysL組。 3.WKY組及SHR組的SIMCA均表達(dá)tTG、GGEL，SHR組的SIMCA表達(dá)的tTG、GGEL平均光密度值(IOD)均顯著高于WKY組(分別為1476.36±204.23 vs345.67±63.87，836.61±157.76 vs155.77±27.48，P均<0.01)；經(jīng)胱胺治療12周后，CysH組和CysL組的tTG、GGEL的IOD值低于SHR組，CysH組降低更明顯(544.21±103.52

6、vs1476.36±204.23，208.52±34.85 vs836.61±157.76，P均<0.01)。Western Blot檢測左室心肌組織tTG的表達(dá)，SHR組明顯高于WKY組(P<0.01)，而兩劑量組胱胺治療12周，tTG表達(dá)水平明顯低于SHR組(P<0.01)。 4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束時SHR組LVM、LVMI明顯高于WKY組，差異顯著(3.20±0.10 vs2.73±0.08，P<0.01)；經(jīng)過12周胱胺治療，Cy

7、sH組的LVM、LVMI明顯低于SHR組(2.98±0.14 vs3.20±0.10，P<0.01)；CysL組與SHR比較差異無顯著性。 5.SHR組、CysH組和CysL組的血流動力學(xué)檢查各項均顯著高于WKY組，兩劑量組除左室舒展末壓顯著低于SHR組外，其余各項與SHR組無明顯差別。SHR組的舒張期室間隔厚度(IVSd)、收縮期室間隔厚度(IVSs)及舒張期左室后壁厚度(LVPWd)與WKY組相比有顯著差異(P<0.01)，

8、CysH組的IVSd、IVSs與LVPWd較SHR組降低(P<0.05)，余無顯著差別，CysL組與SHR組無明顯差異。 6.至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時，除CysH組有2只大鼠死亡外，余大鼠存活未見明顯影響。CysH、CysL組的肌酐(CREA)以及血漿丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)較WKY組、SHR組有明顯升高(P均<0.01)，但仍在正常范圍，CysH組與CysL組間、SHR組與WKY組間各項血生化指標(biāo)無明顯差別(P均>0.05)。

9、結(jié)論: 1.24周齡SHR的SIMCA發(fā)生明顯重構(gòu)時，伴tTG表達(dá)增高，tTG抑制劑胱胺治療后，SHR的SIMCA重構(gòu)減輕，同時其tTG的表達(dá)水平也下降：tTG的活性標(biāo)志物GGEL在各組大鼠SIMCA表達(dá)的變化與tTG-致，提示tTG在SIMCA的重構(gòu)中起重要作用。 2.胱胺能抑制SHR的左室心肌肥厚，改善左室舒張功能。 3.胱胺干預(yù)低劑量組SHR存活情況未見明顯影響，對SHR的SIMCA重構(gòu)起到了抑制作用，對S