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1、本文研究了溶解氧變化對(duì)凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白合成、代謝和滲透調(diào)節(jié)影響,主要內(nèi)容包括:①溶解氧對(duì)凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白、組織Cu含量和肝胰臟血藍(lán)蛋白亞基表達(dá)的影響②溶解氧對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴中血藍(lán)蛋白和氨基酸含量的影響③溶解氧對(duì)凡納濱蝦血藍(lán)蛋白含量和血淋巴酚氧化酶活力的影響④溶解氧對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴滲透壓和鰓絲Na<'+>/K<'+>-ATPase活力的影響。主要研究結(jié)果如下: 1.溶解氧對(duì)凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白、組織Cu含量和肝胰臟血藍(lán)蛋白亞
2、基表達(dá)的影響 本實(shí)驗(yàn)研究了溶解氧變化72h內(nèi),凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白、組織Cu含量和肝胰臟血藍(lán)蛋白亞基表達(dá)的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:溶解氧變化(5.5→3.0→1.5mg/L)對(duì)凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白、組織Cu含量影響顯著(P<0.05),肝胰臟中血藍(lán)蛋白亞基的表達(dá)也發(fā)生顯著變化。各處理組血藍(lán)蛋白和血清Cu含量變化趨勢(shì)相似,均在升高后又恢復(fù)到對(duì)照水平,且溶解氧越低上升幅度越大;肝胰臟Cu的變化趨勢(shì)與前兩者相反,出現(xiàn)最低值后逐漸上升至高于對(duì)照
3、的水平,并趨于穩(wěn)定。SDS-PAGE圖譜顯示,各處理組肝胰臟血藍(lán)蛋白兩亞基73和75kDa的的蛋白條帶隨實(shí)驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸變粗,且溶解氧越低,蛋白越粗,說明表達(dá)的量越多。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看:溶解氧降低肝胰臟內(nèi)有血藍(lán)蛋白亞基大量合成,血淋巴中血藍(lán)蛋白含量也隨之升高,組織Cu隨血藍(lán)蛋白的合成在血清和肝胰臟中動(dòng)態(tài)分布。 2.溶解氧對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴中血藍(lán)蛋白和氨基酸含量的影響 本實(shí)驗(yàn)研究了溶解氧變化72h內(nèi),凡納濱對(duì)蝦血淋巴中血藍(lán)蛋
4、白和氨基酸含量的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:溶解氧變化(5.5→3.0→1.5mg/L)對(duì)凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白和血淋巴氨基酸含量的影響顯著(P<0.05)。各處理組血藍(lán)蛋白在升高后又恢復(fù)到對(duì)照水平,且溶解氧越低上升幅度越大;兩處理組各種氨基酸含量在實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)均呈現(xiàn)出高趨勢(shì),溶解氧越低氨基酸的升高幅度越大,且在血淋巴中含量越高的氨基酸升高幅度也越大,如含量最高的Asp、Val、Glu升高幅度最大,相應(yīng)地,血淋巴總氨基酸含量在實(shí)驗(yàn)時(shí)間內(nèi)也呈現(xiàn)出升高趨勢(shì)
5、。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:溶解氧降低,血藍(lán)蛋白合成機(jī)制被啟動(dòng),血藍(lán)蛋白的合成底物—氨基酸含量亦隨之升高,且溶解氧愈低,氨基酸的含量愈高;體內(nèi)血藍(lán)蛋白含量升高。 3.溶解氧對(duì)凡納濱蝦血藍(lán)蛋白含量和血淋巴酚氧化酶活力的影響 本試驗(yàn)研究了溶解氧變化72h內(nèi),凡納濱蝦血藍(lán)蛋白和血淋巴酚氧化酶活力的變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:溶解氧變化(5.5→3.0→1.5mg/L)對(duì)凡納濱對(duì)蝦血藍(lán)蛋白含量和血細(xì)胞、血漿酚氧化酶活力影響顯著(P<0.05)。各處
6、理組血藍(lán)蛋白在升高后又恢復(fù)到對(duì)照水平,且溶解氧越低上升幅度越大;血漿酚氧化酶活力在0-12h內(nèi)呈上升趨勢(shì),12h后趨于穩(wěn)定,且溶解氧越低酶活力越高;各處理組血細(xì)胞酚氧化酶活力在0-36h內(nèi)呈下降趨勢(shì),36h后趨于穩(wěn)定,而且溶解氧越低酶活力也越低。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看:溶解氧降低,血漿酚氧化酶活力升高的幅度遠(yuǎn)小于血細(xì)胞酚氧化酶活力所降低的幅度,在這一過程中無(wú)法判斷是否存在血藍(lán)蛋白向的酚氧化酶轉(zhuǎn)化,但也不能否認(rèn)這一現(xiàn)象的存在,可能與甲殼動(dòng)物體內(nèi)的蛋
7、白酶抑制劑對(duì)酚氧化酶的抑制作用有關(guān)。 4.溶解氧對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴滲透壓和鰓絲離子轉(zhuǎn)運(yùn)酶的影響 本實(shí)驗(yàn)研究了溶解氧對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴滲透壓和鰓絲離子轉(zhuǎn)運(yùn)酶的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為:溶解氧變化對(duì)凡納濱對(duì)蝦血淋巴滲透壓、鰓絲Na<'+>/K<'+>-ATPase活力影響顯著,而對(duì)鰓絲V-ATPase的活力無(wú)顯著影響。兩處理組血淋巴滲透壓在出現(xiàn)最低值后又逐漸向?qū)φ账交謴?fù);兩處理組血藍(lán)蛋白、血淋巴總氨基酸含量均呈先升后降,并恢復(fù)到正
8、常水平的趨勢(shì);兩處理組的鰓絲Na<'+>/K<'+>-ATPase活力在0-12h內(nèi)呈升高趨勢(shì),12h酶活力最大,且溶解氧越低酶活力越高,此后開始下降,48h后趨于穩(wěn)定,穩(wěn)定后的值與對(duì)照無(wú)顯著差異。結(jié)果表明:溶解氧降低,血藍(lán)蛋白的基本合成底物—氨基酸隨著血藍(lán)蛋白的合成,在血淋巴中的含量大幅升高,為了保持滲透壓效應(yīng)物總量的穩(wěn)定,血淋巴中的無(wú)機(jī)離子很可能會(huì)大量外流,因此血淋巴滲透壓降低。而在外界離子未變化的情況下,機(jī)體應(yīng)該是保持正常水平的滲
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