凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)血藍蛋白免疫作用的初步研究.pdf

1、本文研究了注射磷脂酰絲氨酸（PS）和病原菌對凡納濱對蝦血藍蛋白合成、酚氧化酶活性的影響。主要內(nèi)容包括：
　?、僮⑸淞字＝z氨酸對凡納濱對蝦血藍蛋白合成、酚氧化酶活性的影響；
　?、谧⑸涔S氏弧菌和金黃色葡萄球菌對凡納濱對蝦血藍蛋白合成、酚氧化酶活性的影響。
　　主要研究結果如下：
　　1、注射PS對凡納濱對蝦血藍蛋白合成、酚氧化酶活性的影響
　　結果表明：注射0.25,0.5,1μg PS對凡納濱對蝦血藍蛋

2、白含量、p75和p77亞基、mRNA表達以及血細胞總數(shù)（THC）、血細胞酚氧化酶原（pro-PO）、血漿酚氧化酶（PO）、血藍蛋白酚氧化酶（Hd-PO）以及抗菌和溶菌活力影響顯著（P<0.05）,而對照組無顯著變化。血藍蛋白含量在6h內(nèi)略有下降，6~36h內(nèi)呈峰值變化，24h時達到最大值；血藍蛋白亞基p75、p77和基因表達在0~36h內(nèi)呈峰值變化，12h時達到最大值。THC和pro-PO活力在0~12h內(nèi)處于下降趨勢，并在12h處達到

3、最低值；PO活力在48h內(nèi)呈峰值變化，于12h處達到最高值；Hd-PO活性在36h內(nèi)呈峰值變化，12h時達到最大值。抗菌和溶菌活力分別在36h和48h之內(nèi)呈峰值變化，并分別于12h和24h處達到最高值。由此說明，PS能夠激活凡納濱對蝦血藍蛋白的酚氧化酶活性，引起一系列免疫指標的變化，表現(xiàn)出明顯的時間劑量效應，在短時間內(nèi)引起血藍蛋白含量下降，隨后機體啟動血藍蛋白的合成機制，證實PS是凡納濱對蝦血藍蛋白發(fā)揮酚氧化酶活性的激活因子，同時PS還

4、是對蝦體內(nèi)的一種免疫刺激物質(zhì)，為對蝦血藍蛋白免疫活性的研究奠定了理論基礎。
　　2、注射哈維氏弧菌和金黃色葡萄球菌對凡納濱對蝦血藍蛋白合成、酚氧化酶活性的影響
　　結果表明，哈維氏弧菌（Vibro harveyi）（×105cells/mL,×106cells/mL）和高濃度組（×106cells/mL）金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）對血藍蛋白含量、p75和p77亞基、mRNA表達以及血漿PO、

5、Hd-PO以及抗菌和溶菌活力影響顯著（P<0.05）,而對照組則無顯著變化。在48h之內(nèi)：血藍蛋白含量呈波動趨勢，12h降為最低值，24h達最大；血藍蛋白p75、p77亞基和mRNA表達呈峰值變化，其中p75、p77亞基表達于24h達峰值，mRNA表達于12h處達峰值。血漿PO和Hd-PO活力在24h處達最高值；抗菌和溶菌活力分別在12h和24h達最大值。
　　低濃度組金黃色葡萄球菌（×105cells/mL）對血藍蛋白合成、酚氧

6、化酶活性影響不顯著，對血漿抗菌和溶菌活力影響顯著（P<0.05）。其中，48h之內(nèi)抗菌活力在12h達到最大值，而溶菌活力在24h處達到最大值。所有處理組中血細胞抗菌肽penaedin1/2表達不顯著。
　　結果說明，對蝦在病原菌哈維氏弧菌入侵下啟動了血藍蛋白的合成，誘導血藍蛋白基因的表達，新合成的血藍蛋白主要執(zhí)行酚氧化酶（Hd-PO）等免疫功能，參與免疫防御，進一步提升血淋巴中pro-PO激活系統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)作用；注射高濃度的金黃色