調(diào)補(bǔ)肺腎三法治療 COPD穩(wěn)定期大鼠的遠(yuǎn)后效應(yīng)及其對基質(zhì)金屬蛋白酶的影響.pdf

1、　　目的
　　1 評價(jià)補(bǔ)肺健脾法、補(bǔ)肺益腎法和益氣滋腎法對COPD的療效及其遠(yuǎn)后效應(yīng),并探討其作用特點(diǎn)。
　　2 探討補(bǔ)肺健脾法、補(bǔ)肺益腎法和益氣滋腎法治療COPD的機(jī)制,揭示其遠(yuǎn)后效應(yīng)機(jī)制。
　　方法
　　大鼠隨機(jī)分為空白對照組、模型組、補(bǔ)肺健脾組、補(bǔ)肺益腎組、益氣滋腎組和氨茶堿組,每組 20 只。采用香煙熏吸聯(lián)合反復(fù)細(xì)菌感染的方法制作穩(wěn)定期COPD大鼠模型。于第9周開始分別給予相應(yīng)的藥物治療至

2、第20周,半數(shù)取材,其余動物正常飼養(yǎng)至第32周,取材。檢測大鼠肺功能(TV、PEF、EF50)、外周血中白細(xì)胞(white blood cell,WBC)計(jì)數(shù)和中性粒細(xì)胞比率、肺組織病理(支氣管管壁厚度、支氣管管腔狹窄程度、單位面積肺泡計(jì)數(shù)和肺泡直徑、肺小血管壁厚度)、肺組織 I、III 和 IV 型膠原表達(dá)、肺組織 MMP-2、MMP-9 和 TIMP-1表達(dá)等。
　　結(jié)果
　　1 一般情況
　　模型組大

3、鼠較對照組形體消瘦,精神倦怠,活動減少,進(jìn)食量、飲水量減少,大便溏薄,墊料潮濕等,3 個(gè)中藥組(補(bǔ)肺健脾組、補(bǔ)肺益腎組和益氣滋腎組,下同)和氨茶堿組可以改善上述變化,其中以補(bǔ)肺健脾組和補(bǔ)肺益腎組尤為明顯。各組大鼠的體重隨周齡增長逐漸增加。模型組大鼠體重增長趨勢較對照組緩慢(P>0.05)。3 個(gè)中藥組和氨茶堿組體重自第 12 周增長趨勢較模型組加快,但對照組、模型組、3個(gè)中藥組和氨茶堿組間無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　

4、　2 肺功能
　　模型組TV、PEF、EF50水平從第4周開始較對照組明顯降低(P<0.05或P<0.01)。與模型組相比,3 個(gè)中藥組從 16 周起即可明改善 PEF 和 EF50 水平(P<0.05 或P<0.01),TV 值也從 20 周起明顯升高(P<0.05 或 P<0.01)；氨茶堿組僅在第 20周和第 28 周時(shí) PEF 值明顯升高(P<0.05)。在 32周的觀察期間,3個(gè)中藥組和氨茶堿組間TV、PEF、EF5

5、0水平無顯著差異(P>0.05)。
　　3外周血中白細(xì)胞計(jì)數(shù)及中性粒細(xì)胞比率
　　第20、32周時(shí),模型組外周血WBC計(jì)數(shù)和中性粒細(xì)胞比率較對照組有升高趨勢,但無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　4 肺臟病理
　　第20、32周結(jié)束時(shí),模型組大鼠支氣管壁厚度、支氣管狹窄程度、肺泡平均直徑以及肺小血管壁增厚等均較對照組顯著增高(P<0.01),單位面積肺泡數(shù)明顯減少(P<0.01),3個(gè)中藥組及

6、氨茶堿組與模型組相比上述病理明顯減輕(P<0.05或P<0.01)；且在第32周時(shí),3個(gè)中藥組在改善支氣管壁厚度、肺泡大小和肺小血管壁增厚方面明顯優(yōu)于氨茶堿組(P<0.01),而中藥組間無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　5 肺組織Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型膠原
　　第20、32周結(jié)束時(shí),模型組大鼠I、III和IV型膠原表達(dá)明顯高于對照組(P<0.01)；3個(gè)中藥組的I、III和IV型膠原表達(dá)均較模型組顯著降低(P<0.05或

7、P<0.01)；而氨茶堿組在第20周時(shí)僅有I型膠原明顯降低(P<0.05),在第32周時(shí)僅有III型膠原降低(P<0.01)；補(bǔ)肺益腎組和益氣滋腎組IV 型膠原在第32周時(shí)較氨茶堿組明顯降低(P<0.05)；但3個(gè)中藥組間未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　6 肺組織MMP-9、MMP-2和TIMP-1
　　第20周結(jié)束時(shí),模型組肺組織MMP-2和MMP-9較對照組明顯升高(P<0.01), TIMP-1明顯降

8、低(P<0.01)；與模型組相比,補(bǔ)肺健脾組和補(bǔ)肺益腎組肺組織MMP-2的表達(dá)明顯降低(P<0.05),3個(gè)中藥組和氨茶堿組MMP-9表達(dá)顯著降低(P<0.05或P<0.01),TIMP-1顯著升高(P<0.05或P<0.01)。第32周結(jié)束時(shí),與模型組比較, 3個(gè)中藥組和氨茶堿組肺組織MMP-2、MMP-9的表達(dá)降低(P<0.05,P<0.01),TIMP-1顯著升高( P<0.05或P<0.01),但各治療組間未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P

9、>0.05)。
　　7 肺組織病理與MMP-2、MMP-9和TIMP-1的相關(guān)分析
　　相關(guān)分析表明,支氣管壁厚度與MMP-2(r=0.365,P=0.029)、MMP-9(r=0.478, P=0.003)顯著正相關(guān),與 TIMP-1 顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.497,P=0.002)；支氣管狹窄程度與MMP-9顯著正相關(guān)(r=0.532,P=0.001),與TIMP-1顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.457,P=0.005)；

10、肺泡直徑與MMP-2(r=0.469,P=0.004)、MMP-9(r=0.345,P=0.040)顯著正相關(guān),與TIMP-1顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.571,P=0.000)；單位面積肺泡數(shù)與TIMP-1顯著負(fù)相關(guān)(r=0.330,P=0.050)；血管壁厚度與MMP-2(r=0.474,P=0.003)、MMP-9(r=0.438, P=0.007)顯著正相關(guān),與TIMP-1顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.604,P=0.000)。
　

11、　結(jié)論
　　1 補(bǔ)肺健脾方、補(bǔ)肺益腎方和益氣滋腎方可以明顯改善COPD穩(wěn)定期大鼠一般狀況及肺功能、肺組織病理損害,具有顯著療效和遠(yuǎn)后效應(yīng)。
　　2 COPD的小氣道和小血管重塑等與MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表達(dá)密切相關(guān),提示金屬基質(zhì)蛋白酶失衡可能為COPD發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制之一。
　　3 補(bǔ)肺健脾方、補(bǔ)肺益腎方和益氣滋腎方對COPD大鼠具有一定的療效,其機(jī)制可能與參與調(diào)節(jié)基質(zhì)金屬蛋白酶平衡有關(guān),