抑癌基因肺癌抑制物1(TSLC1)對人食管癌Eca109細胞裸鼠移植瘤生長增殖的影響.pdf

1、[目的]
　　 建立轉染人TSLC1基因的人食管癌Eca109細胞穩(wěn)定表達株和探討TSLC1基因在調(diào)節(jié)食管癌細胞在裸鼠體內(nèi)生長和浸潤中的作用，為進一步明確TSLC1基因對食管癌的作用機制奠定基礎。
　　 [方法]
　　 1.轉染人TSLC1基因的人食管癌Eca109細胞穩(wěn)定表達株的建立
　　 (1)pIRES2-EGFP-TSLC1重組質(zhì)粒轉染人食管癌Eca109細胞株；
　　 (2)轉染了TSL

2、C1基因的人食管癌Eca109細胞株的陽性篩選與克隆。
　　 2.TSLC1基因對人食管癌Eca109細胞裸鼠移植瘤生長增殖的影響
　　 (1)裸鼠皮下成瘤：實驗組、對照組及空白組細胞分別于裸鼠背部皮下注射以形成皮下腫瘤，每組注射10只。
　　 (2)裸鼠尾靜脈注射形成內(nèi)臟轉移瘤：實驗組、對照組及空白組細胞分別于裸鼠尾靜脈注射以形成內(nèi)臟轉移瘤，每組注射10只。
　　 3.指標檢測
　　 ①觀察三組

3、細胞形態(tài)學改變。
　　 ②TSLC1在細胞內(nèi)表達情況：RT-PCK檢測。
　　 ③小鼠一般情況觀察。
　　 ④腫瘤生長變化：每隔一天用游標卡尺測量裸鼠皮下腫瘤最大的長徑、寬徑及厚徑一次，三徑互相垂直，記錄體積變化。
　　 ⑤抑瘤率：抑瘤率=空白組腫瘤平均體積-實驗組腫瘤平均體積/空白組腫瘤平均體積x100％。
　　 ⑥病理學檢查：裸鼠皮下及肝、肺臟內(nèi)成瘤大小，浸潤范圍，腫瘤組織分化差異，腫瘤血管形

4、成的差異等。
　　 [結果]
　　 1.TSLC1在細胞內(nèi)表達情況
　　 陽性篩選后通過RT-PCR測定實驗組細胞中TSLC1基因的表達，結果顯示實驗組細胞存在TSLC1基因表達。
　　 2.細胞形態(tài)變化
　　 實驗組細胞呈圓形或橢圓形，聚集成團，細胞團之間疏散，細胞狀態(tài)較差；對照組和空白組細胞呈多邊形或梭形，細胞之間交織緊密，細胞生長旺盛。
　　 3.小鼠一般情況
　　 實驗組裸

5、鼠生活狀態(tài)始終正常、食欲旺盛、行動自如?？瞻捉M和對照組裸鼠逐漸出現(xiàn)食欲不振、精神萎靡、活動減少。
　　 4.腫瘤生長變化
　　 空白組裸鼠于接種后5天開始出現(xiàn)腫瘤，腫瘤的平均體積為272.42mm3。對照組裸鼠于接種后5天開始出現(xiàn)腫瘤，腫瘤的平均體積為256.34mm3。實驗組裸鼠于接種后10天開始出現(xiàn)腫瘤，腫瘤的平均體積為162.07mm3。
　　 5.抑瘤率
　　 抑瘤率：抑瘤率=空白組腫瘤平均體積-

6、實驗組腫瘤平均體積/空白組腫瘤平均體積x100％。抑瘤率=272.42.162.07/272.42x100％=40.51％。
　　 6.病理學檢查
　　 (1)皮下成瘤：實驗組腫瘤大小及浸潤范圍均小于空白組和對照組，腫瘤分化稍好于空白組和對照組，腫瘤血管形成較空白組和對照組差?？瞻捉M和對照組之間無明顯差異。
　　 (2)內(nèi)臟成瘤：三組裸鼠內(nèi)臟均無形成明確的腫瘤，尚無法比較。
　　 [結論]