兩個(gè)常染色體隱性視網(wǎng)膜色素變性合并白內(nèi)障家系的致病基因突變分析.pdf

1、視網(wǎng)膜色素變性（Retinitis Pigmentosa，RP）是一種常見的遺傳性視網(wǎng)膜功能退行性疾病，全球發(fā)病率為1:3000-5000。RP典型臨床癥狀為夜盲、進(jìn)行性視野缺損和視力下降，可伴發(fā)斜視、屈光不正、眼球震顫和白內(nèi)障等，其中白內(nèi)障發(fā)生率高于40％。本研究收集了兩個(gè)常染色體隱性視網(wǎng)膜色素變性合并白內(nèi)障家系，通過連鎖分析、候選基因測(cè)序及外顯子組測(cè)序等方法鑒定了這兩個(gè)家系的致病基因及突變，并對(duì)其分子致病機(jī)理進(jìn)行了初步探討，結(jié)果如下

2、：
　　家系1三位患者分別來自兩個(gè)換親家庭，眼底檢查發(fā)現(xiàn)其視網(wǎng)膜有骨針樣色素沉積、血管變細(xì)、視盤蒼白和不同程度的黃斑萎縮，且雙眼并發(fā)后囊下白內(nèi)障，呈放射狀。以微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)家系1已知常染色體隱性RP致病基因進(jìn)行了連鎖分析，將其致病基因定位于14號(hào)染色體微衛(wèi)星標(biāo)記D14S163和D14S1050之間。該區(qū)間內(nèi)有兩個(gè)已知常染色體隱性RP致病基因RDH12和SPATA7，對(duì)先證者基因組DNA直接測(cè)序發(fā)現(xiàn)RDH12復(fù)合雜合突變（c.184C

3、>T/p.R62X和c.437T>A/p.V146D）和SPATA7雜合改變c.995T>C/p.I332T。RFLP分析證實(shí)RDH12復(fù)合雜合突變?cè)诩蚁祪?nèi)與疾病共分離，而且在家系外100個(gè)正常人中未檢測(cè)到這兩個(gè)突變。保守性分析發(fā)現(xiàn)RDH12第62位精氨酸和146位纈氨酸從斑馬魚到人類高度保守。RDH12 c.184C>T和c.437T>A為已報(bào)道突變，說明這兩個(gè)突變對(duì)疾病均有貢獻(xiàn)。因此推測(cè)RDH12基因復(fù)合雜合突變c.184C>T/p

4、.R62X，c.437T>A/p.V146D可能為家系1患者致病的遺傳基礎(chǔ)。該家系三位患者均攜帶SPATA7雜合改變c.995T>C/p.I332T，它是否會(huì)影響患者的臨床表型有待于進(jìn)一步分析。全球有11.8%的RP患者攜帶RDH12突變，其中白內(nèi)障并發(fā)率大于40%，但該基因突變?cè)谥袊?guó)RP人群中較為罕見。結(jié)合本研究結(jié)果，目前僅在6個(gè)漢族RP家系和8例漢族散發(fā)患者中發(fā)現(xiàn)RDH12突變，占中國(guó)RP患者的4.6%，其中并發(fā)白內(nèi)障為30%。進(jìn)一

5、步統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)在20例漢族RDH12突變患者中，12例均攜帶c.437T>A突變，說明該位點(diǎn)在漢族RP患者中是一個(gè)突變熱點(diǎn)。
　　家系2三位患者來自一近親結(jié)婚家庭，眼底檢查可見視網(wǎng)膜骨針樣和團(tuán)塊狀色素沉積，脈絡(luò)膜嚴(yán)重萎縮，雙眼合并粉塵狀后囊下白內(nèi)障，其中先證者和一位患者眼底視網(wǎng)膜不見結(jié)晶樣沉積，另一患者視網(wǎng)膜則可見少量結(jié)晶樣沉積。外顯子組測(cè)序發(fā)現(xiàn)先證者和一位患者均攜帶CYP4V2基因的純合突變c.1198C>T，進(jìn)一步測(cè)序發(fā)現(xiàn)該純合突

6、變與家系2疾病共分離。CYP4V2 c.1198C>T突變導(dǎo)致CYP42V蛋白第400位高度保守的精氨酸變?yōu)榘腚装彼幔╬.R400C）。CYP4V2 c.1198C>T/p.R400C為已報(bào)道突變，說明該突變?cè)诩膊“l(fā)生中起作用。這些結(jié)果說明CYP4V2純合突變c.1198C>T/p.R400C可能是家系2患者的致病原因。本研究進(jìn)一步證實(shí)該基因突變引起的疾病表型具有異質(zhì)性，同時(shí)也為研究BCD患者CYP4V2基因的突變類型和突變頻率提供了數(shù)