天麻素對戊四氮致癇大鼠腦內(nèi)血管的保護作用.pdf

1、目的：應用天麻素對戊四氮致癇大鼠進行干預治療，并與丙戊酸鈉進行比較，觀察大腦海馬區(qū)血管內(nèi)皮細胞的組織學改變，通過TUNEL染色和抗人原始造血細胞抗原(CD34)表達的變化，進行半定量檢測，探討天麻素對血管內(nèi)皮的保護作用及可能的機制。 方法：102只健康成年雄性無特定病原體動物(SPF)級Wistar大鼠，隨機分為對照組(6只)，戊四氮(PTZ)組(75mg.kg-1，ip，24只)，丙戊酸鈉(VPA)干預組(PTZ75 mg.k

2、g-1，ip后，給予VPA20mg.kg-1，ip，24只)，小劑量天麻素(Gs)干預組(PTZ75mg.kg-1，ip后，給予天麻素100mg.kg-1，ip，24只)和大劑量天麻素(Gb)干預組(PTZ 75mg.kg-1，ip后，給予天麻素200mg.kg-1，ip，24只)。采用PTZ腹腔注射制備大鼠癲癇模型，致癇后分別給予VPA、Gs、Gb進行干預治療，并分別于12小時，48小時，5天和7天后4個時間點處死取材。進行蘇木素-伊

3、紅染色(HE染色法)，觀察海馬區(qū)神經(jīng)元及血管內(nèi)皮的組織學改變，并進行TUNEL染色、CD34免疫組織化學染色檢測，觀察血管內(nèi)皮染色表達，分析比較各組、各時間點CD34的微血管密度(MVD)值的變化。 結(jié)果：HE染色示，對照組海馬區(qū)神經(jīng)元排列整齊緊密，細胞核呈圓形或橢圓形，核仁清晰呈藍色，染色均質(zhì)，形態(tài)正常。血管壁細胞排列整齊，細胞核呈長橢圓形，染色均質(zhì)，呈淡藍色；PTZ組海馬區(qū)神經(jīng)元及血管內(nèi)皮細胞變性、壞死顯著，細胞核固縮，核碎

4、裂樣改變，細胞周隙增大，細胞脫失明顯，部分血管壁形態(tài)不規(guī)整；VPA組和Gs組、Gb組上述損害較輕，可見散在變性和壞死神經(jīng)元，程度較PTZ組輕。在TUNEL染色中，對照組未見TUNEL染色陽性，PTZ組血管內(nèi)皮細胞以及周邊細胞均有明顯的TUNEL染色陽性表達。而治療組，包括VPA組、Gs組與Gb組，尤其是Gb組TUNEL陽性細胞顯著減少。CD34染色顯示，對照組血管壁細胞排列整齊，細胞核呈淡藍色，未見CD34染色陽性；驚厥發(fā)作后各組12小

5、時未見CD34染色陽性細胞； PTZ組血管內(nèi)皮細胞CD34染色陽性，48小時胞漿呈淡棕色；隨時間的延長CD34染色加深，胞漿濃染，呈棕色，部分細胞形態(tài)改變，5天達高峰，7天染色開始變?nèi)酢PA組和大劑量天麻素組、小劑量天麻素組在48小時、5天、7天時間點的CD34表達均相對較弱，血管內(nèi)皮細胞胞漿染色稍淺，且微血管計數(shù)均明顯少于PTZ組。其中，PTZ組48小時～7天與VPA組比較陽性表達微血管密度(MVD)差異有統(tǒng)計學意義，與大劑

6、量天麻素組比較陽性表達微血管密度(MVD)差異有統(tǒng)計學意義，與小劑量天麻素組比較陽性表達微血管密度(MVD)差異有統(tǒng)計學意義。VPA組與大劑量天麻素組、小劑量天麻素組比較陽性表達微血管密度(MVD)差異無統(tǒng)計學意義。 結(jié)論：戊四氮誘導的癲癇模型可導致明確的海馬區(qū)血管的損傷。大、小劑量天麻素和丙戊酸鈉干預治療后都能減輕海馬區(qū)血管內(nèi)皮細胞的損傷，兩種藥物療效相當。天麻素能夠保護腦內(nèi)血管免受由癲癇導致的損傷。進一步研究其血管內(nèi)皮的保護