乙肝后肝硬化易感性與細(xì)胞因子基因多態(tài)性的關(guān)系.pdf

1、背景與目的：乙肝病毒（HBV）慢性感染者只有小部分最終發(fā)展為乙肝后肝硬化。肝硬化的發(fā)生除與環(huán)境因素、病毒因素有關(guān)外，還與患者的免疫遺傳因素密切相關(guān)。有關(guān)細(xì)胞因子基因多態(tài)性與HBV感染臨床轉(zhuǎn)歸的關(guān)系已有不少報(bào)道，但與乙肝后肝硬化的易感性報(bào)道不多，并缺乏系統(tǒng)性。本研究對(duì)5個(gè)細(xì)胞因子基因的8個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)，以期較系統(tǒng)地分析細(xì)胞因子基因多態(tài)性與乙肝后肝硬化易感的關(guān)系，并篩選出主要的相關(guān)位點(diǎn)，為乙肝后肝硬化風(fēng)險(xiǎn)的分子預(yù)測(cè)奠定基礎(chǔ)。

2、方法： （1）研究對(duì)象：以165例乙肝后肝硬化患者（病例組）及136例HBsAg攜帶者（對(duì)照組）做為研究對(duì)象。 （2）基因多態(tài)性分析：采用酚.氯仿法提取外周血基因組DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性（PCR-RFLP）或序列特異性引物法（PCR-SSP）分析基因位點(diǎn)TNF-α（-308和-238）、IL-1α（-889）、IL-1β（-511和+3953）、IL-10（-592）和IFN-γ（+884和+21

3、09）的基因型。 （3）數(shù)據(jù)分析：計(jì)算各位點(diǎn)基因型和等位基因頻率，比較組間各基因型的差異，并進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡吻合度檢驗(yàn)。分別以總樣本、按性別分層進(jìn)行單因素Logistic回歸分析，計(jì)算各基因型及等位基因的比數(shù)比（OR）及95％可信區(qū)間，以及進(jìn)行多因素Logistic回歸分析篩選獨(dú)立的易感與保護(hù)基因型和等位基因。 結(jié)果： （1）腫瘤壞死因子α基因-308G/A和-238G/A兩位點(diǎn)的各基因型及等

4、位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），單因素和多因素Logistic分析也未顯示它們與乙肝肝硬化易感性相關(guān)。 （2）白細(xì)胞介素1α-889C/T位點(diǎn)的各基因型及等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），但多因素分析顯示該位點(diǎn)與乙肝后肝硬化相關(guān)，CC為保護(hù)基因型（OR=0.416，P=0.040），T為易感等位基因（OR=2.361，P=0.044）。

5、 （3）白細(xì)胞介素1β-511C/T和+3953C/T兩位點(diǎn)的各基因型及等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），但多因素分析顯示-511C/T位點(diǎn)與男性肝硬化易感性相關(guān)，CC為男性易感基因型（OR=2.719，P=0.036），T為男性保護(hù)等位基因（OR=0.411，P=0.056），而+3953C/T位點(diǎn)與女性乙肝后肝硬化易感性可能有一定關(guān)系，CC基因型、CT基因型和T等位基因的OR值接

6、近有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.071）。 （4）白細(xì)胞介素10基因-592A/C位點(diǎn)各基因型和等位基因在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），但單因素分析顯示AC基因和C等位基因與肝硬化可能有一定關(guān)系，兩者的OR值接近有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.077、0.057），多因素回歸分析顯示AC為易感基因型（OR=1.795，P=0.048），C為易感等位基因（OR=1.755，P=0.046）；分性別多因素分析顯示該位

7、點(diǎn)主要與男性乙肝后肝硬化易感性相關(guān)，AC為男性易感等位基因（OR=2.865，P=0.006），C是易感等位基因（OR=2.665，P=0.012）。 （5）干擾素-γ+874T/A位點(diǎn)TT及TA基因型頻率在兩組間有差異（P=0.038、0.023），單因素回歸分析TT、TA基因型和A等位基因與肝硬化可能有一定關(guān)系，各自O(shè)R值均接近有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.064、0.080和0.057），但多因素分析未顯示其與肝硬化易感性有關(guān)。干

8、擾素-γ+2109A/G位點(diǎn)各基因型及等位基因頻率在肝硬化組和HBsAg攜帶組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.10），多因素Logistic分析也未顯示其與肝硬化易感性有關(guān)。 （6）多因素Logistic回歸分析顯示IL1α-889、IL1β-511、IL-10-592、INF+2109位點(diǎn)的某些基因型或等位基因均與男性乙肝肝硬化易感性相關(guān)（P=0.006～0.093），但在女性未顯示有密切相關(guān)的基因型或等位基因，只有INF+2

9、109AA與肝硬化易感性可能有一定關(guān)系（P=0.071）。 結(jié)論： （1）腫瘤壞死因子a基因-238G/A位點(diǎn)和-308G/A位點(diǎn)基因多態(tài)性均與乙肝后肝硬化易感性無(wú)明顯相關(guān)； （2）白細(xì)胞介素1α-889C/T位點(diǎn)基因多態(tài)性與乙肝后肝硬化易感性相關(guān)，是獨(dú)立的相關(guān)因素； （3）白細(xì)胞介素1β-511C/T和1β+3953C/T位點(diǎn)基因多態(tài)性與乙肝后肝硬化相關(guān)，其中-511C/T位點(diǎn)與男性乙肝后肝硬化易感性密

10、切相關(guān)，+3953C/T位點(diǎn)與女性乙肝后肝硬化易感性有一定關(guān)系； （4）白細(xì)胞介素10-592A/C位點(diǎn)基因多態(tài)性與乙肝后肝硬化易感性相關(guān)，尤其與男性乙肝后肝硬化易感性關(guān)系密切； （5）干擾素-γ+874T/A位點(diǎn)多態(tài)性與乙肝后肝硬化易感性相關(guān)，但可能非獨(dú)立相關(guān)因素，+2109A/G位點(diǎn)多態(tài)性與男性乙肝肝硬化易感性可能有一定關(guān)系。 （6）細(xì)胞因子基因多態(tài)性與男性乙肝后肝硬化易感性關(guān)系密切，與女性關(guān)系不密切，可能是