內(nèi)源性LPS對(duì)奶牛瘤胃與盲腸的炎性損傷機(jī)理.pdf

1、由于現(xiàn)階段我國(guó)牧草資源缺乏，粗飼料品質(zhì)低下，高精料比低精料的日糧模式被逐漸廣泛采用。雖然高精料日糧可以滿足奶牛高泌乳狀態(tài)時(shí)能量和營(yíng)養(yǎng)的需求，但是它也會(huì)導(dǎo)致瘤胃pH下降而產(chǎn)生亞急性瘤胃酸中毒。同時(shí)，高精料日糧的模式也擾亂瘤胃微生物穩(wěn)定的狀態(tài)，瘤胃內(nèi)大量的革蘭氏陰性菌裂解釋放出細(xì)菌內(nèi)毒素(LPS)，引發(fā)瘤胃液和糞中（尤其是盲腸內(nèi)容物中）的LPS含量升高。高濃度的LPS可通過(guò)消化道吸收進(jìn)入血液，血液中LPS含量增加，導(dǎo)致機(jī)體全身性炎癥反應(yīng)綜合

2、征，從各個(gè)方面影響奶牛生產(chǎn)性能和奶牛場(chǎng)經(jīng)濟(jì)效益。本研究主要針對(duì)現(xiàn)階段我國(guó)規(guī)?；膛ｐB(yǎng)殖中日糧精粗比普遍偏高的現(xiàn)況，來(lái)研究產(chǎn)生的內(nèi)源性LPS對(duì)奶牛瘤胃和盲腸的炎性損傷機(jī)理。
　　試驗(yàn)一:瘤胃液與盲腸內(nèi)容物中LPS含量的測(cè)定:我國(guó)大部分牧場(chǎng)為了保持奶牛高泌乳狀態(tài)普遍使用高精料日糧模式，然而，這種模式極易產(chǎn)生亞急性瘤胃酸中毒，從而引起內(nèi)源性LPS的大量產(chǎn)生。本試驗(yàn)主要研究?jī)煞N日糧模式下，高精料/低精料6∶4和高精料/低精料4∶6情況下對(duì)

3、6頭奶牛引起亞急性瘤胃酸中毒，致使機(jī)體產(chǎn)生內(nèi)源性LPS，飼喂6個(gè)月后，屠宰試驗(yàn)動(dòng)物，采集瘤胃液、盲腸內(nèi)容物，利用鱟試劑盒測(cè)定瘤胃液和盲腸內(nèi)容物中LPS含量。結(jié)果表明，盲腸內(nèi)容物中的LPS含量均高于瘤胃液中LPS含量;瘤胃液中LPS含量高精料組高于低精料組，差異顯著(P＜0.05);盲腸內(nèi)容物中LPS含量高精料組高于低精料組，差異極顯著(P＜0.01)。
　　試驗(yàn)二:內(nèi)源性LPS對(duì)瘤胃乳頭、瘤胃壁與盲腸壁組織病理學(xué)影響:為了探討內(nèi)源

4、性LPS對(duì)奶牛瘤胃乳頭、瘤胃壁以及盲腸壁組織形態(tài)學(xué)的影響，試驗(yàn)選擇6頭荷斯坦奶牛，隨機(jī)分為2組，每組3頭，分別飼喂精粗比為6∶4和精粗比為4∶6的日糧飼料，并且6頭奶牛都安裝永久性瘤胃瘺管。試驗(yàn)期為6個(gè)月。飼喂試驗(yàn)進(jìn)行過(guò)程中，經(jīng)瘤胃瘺管進(jìn)行活體采集瘤胃乳頭，將采集的瘤胃乳頭進(jìn)行切片，后經(jīng)HE染色，飼喂試驗(yàn)結(jié)束后屠宰6頭奶牛，分別采取瘤胃壁、盲腸壁樣品，切片后經(jīng)HE染色，對(duì)日糧精粗比不同的兩組奶牛的瘤胃乳頭、瘤胃壁和盲腸壁進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀

5、察。結(jié)果顯示，內(nèi)源性LPS含量的多少，使得瘤胃乳頭和瘤胃壁黏膜層出現(xiàn)不同程度炎性損傷，內(nèi)源性LPS含量高的試驗(yàn)?zāi)膛Ａ鑫溉轭^和瘤胃壁黏膜層厚度變薄，角質(zhì)層出現(xiàn)脫落現(xiàn)象。內(nèi)源性LPS在百腸中含量較高，對(duì)盲腸壁的炎性損傷也較嚴(yán)重，盲腸壁的完整性遭到破壞，盲腸壁黏膜上皮和大腸腺也出現(xiàn)損傷。
　　試驗(yàn)三:內(nèi)源性LPS對(duì)瘤胃乳頭、瘤胃壁、盲腸壁相關(guān)炎性損傷基因表達(dá)的影響:為了探討不同類型飼料日糧產(chǎn)生的內(nèi)源性LPS對(duì)奶牛瘤胃乳頭、瘤胃壁以及盲腸

6、壁的影響，試驗(yàn)選擇6頭荷斯坦奶牛，隨機(jī)分為2組，每組3頭，分別飼喂精粗比為6∶4和精粗比為4∶6的日糧飼料，并且6頭奶牛都安裝永久性瘤胃瘺管。試驗(yàn)期為6個(gè)月。飼喂試驗(yàn)進(jìn)行過(guò)程中經(jīng)瘤胃瘺管進(jìn)行活體采集瘤胃乳頭，液氮處理后保存于-70℃，飼喂試驗(yàn)結(jié)束后屠宰6頭奶牛，分別采取瘤胃壁、盲腸壁樣品，液氮處理后保存于-70℃。針對(duì)對(duì)瘤胃液和盲腸內(nèi)容物中LPS含量不同的兩組奶牛的瘤胃乳頭、瘤胃壁和盲腸壁，利用實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)測(cè)定炎性損傷機(jī)制中關(guān)鍵因