內(nèi)源性L(fǎng)PS對(duì)奶牛肝臟的炎性損傷與機(jī)理研究.pdf

1、我國(guó)作為一個(gè)農(nóng)業(yè)大國(guó)，畜牧業(yè)的發(fā)展在整個(gè)經(jīng)濟(jì)市場(chǎng)上占據(jù)重要的地位。隨著人們生活水平的提高，對(duì)食品的營(yíng)養(yǎng)要求也變得更高。目前，為了提高奶牛的產(chǎn)奶量，滿(mǎn)足市場(chǎng)的需求，很多農(nóng)場(chǎng)開(kāi)始給奶牛飼喂高精料日糧。高精料日糧短期內(nèi)確實(shí)可以提高產(chǎn)奶量，但是長(zhǎng)期飼喂高精料，會(huì)對(duì)奶牛造成瘤胃內(nèi)微生物環(huán)境的改變，造成革蘭氏陰性菌大量繁殖并在細(xì)菌自溶酶的作用下大量崩解，釋放脂多糖(LPS)。脂多糖是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的成分，當(dāng)它從細(xì)胞壁上游離出來(lái)后，毒性會(huì)大幅度增

2、加。脂多糖由消化道進(jìn)入血液，引發(fā)全身性的炎癥反應(yīng)。而肝臟作為機(jī)體消化代謝的主要器官之一，很容易受到脂多糖的攻擊，產(chǎn)生損傷，一旦肝臟受到損傷，全身的組織器官都會(huì)受到牽連。本試驗(yàn)分為三個(gè)部分，研究脂多糖對(duì)肝臟的損傷機(jī)制。
　　1.高精料日糧對(duì)肝功能的影響
　　試驗(yàn)選用六頭成年的荷斯坦奶牛，隨機(jī)分成兩組，一組采用精粗比為6∶4的日糧飼喂，作為試驗(yàn)組;一組采用精粗比4∶6的日糧飼喂，作為對(duì)照組。三個(gè)月后，對(duì)六頭牛施行頸靜脈采血，將血

3、液立即離心分離出血漿，用自動(dòng)干式生化分析儀進(jìn)行肝功能的檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果用SPSS軟件進(jìn)行分析。得出的結(jié)論是:高精料組外周血中白蛋白和總蛋白的濃度顯著低于低精料組，谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶的活性極顯著高于低精料組，說(shuō)明高精料組奶牛肝臟的合成蛋白的功能減弱，肝細(xì)胞受損，使細(xì)胞內(nèi)的酶釋放于外周血液中，造成外周血酶活性的升高，提示肝功能受到影響。
　　2.肝靜脈、門(mén)靜脈中LPS濃度的測(cè)定
　　奶牛飼喂四個(gè)月后，對(duì)奶牛進(jìn)行肝臟

4、慢性血管插管手術(shù)，包括肝靜脈、門(mén)靜脈血管插管，以便于能及時(shí)采樣，定時(shí)、定量的檢測(cè)肝臟對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收情況。采取肝靜脈、門(mén)靜脈血液，分離出血漿，用鱟試劑檢測(cè)這兩種血液中的脂多糖含量，數(shù)據(jù)仍用SPSS分析。得到的結(jié)論是:高精料組門(mén)靜脈中脂多糖的含量極顯著高于低精料組，兩組牛的肝靜脈中的脂多糖含量明顯低于門(mén)靜脈。說(shuō)明瘤胃中產(chǎn)生的脂多糖大量進(jìn)入肝臟，但是經(jīng)過(guò)肝臟的清除作用，出肝時(shí)濃度明顯降低，緩解對(duì)機(jī)體的炎性損傷。
　　3.內(nèi)源性L(fǎng)PS

5、對(duì)奶牛肝臟中炎性因子表達(dá)的影響
　　在手術(shù)過(guò)程中對(duì)肝臟進(jìn)行活體取樣，將樣品一部分放入多聚甲醛中固定，制作組織切片后用HE染色;另一部分保存于-70℃，提取組織RNA，用實(shí)時(shí)熒光PCR(qRT-PCR)的方法檢測(cè)TLR4介導(dǎo)的炎性通路中幾種重要的炎性因子在肝臟中的mRNA的表達(dá)量，數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS分析。得出結(jié)論:高精料組的奶牛肝臟組織出現(xiàn)明顯的病理學(xué)變化，主要表現(xiàn)在肝細(xì)胞的腫脹變性、炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)等;高精料組的炎性因子在肝臟中的表達(dá)高