微生物發(fā)酵橙皮生成曲酸及綜合開發(fā)研究.pdf

1、中國(guó)的柑桔類水果年產(chǎn)量在1000萬(wàn)噸以上，數(shù)量巨大的柑桔加工必然產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物。一般柑桔類果實(shí)會(huì)產(chǎn)生50％左右的皮渣，如果不能很好的綜合開發(fā)，不但會(huì)浪費(fèi)大量資源，而且會(huì)給環(huán)境帶來(lái)很大壓力。橙皮中不僅有可供微生物生長(zhǎng)的豐富的營(yíng)養(yǎng)成分，而且含有生物類黃酮、纖維素、果膠等有用物質(zhì)可供開發(fā)利用。 在本文中從腐爛的桔皮、桔樹根際土壤中篩到一株H-10菌株，以此展開研究，內(nèi)容包括以下幾個(gè)方面： 1．菌種篩選 篩選到菌種H-

2、10，經(jīng)過鑒定該菌種屬于黃-米曲霉組，接近黃曲霉。 2．優(yōu)化發(fā)酵條件發(fā)酵產(chǎn)物檢測(cè)的定性分析 采用TLC法，以在聚酰胺薄膜上觀察到橙皮苷消失，另一紅色斑點(diǎn)產(chǎn)生為目標(biāo)產(chǎn)物，暫定為產(chǎn)物A。得到優(yōu)化發(fā)酵條件：7.5％的橙皮，自然pH值、20％裝液量、25℃、180rpm發(fā)酵120h。 3．產(chǎn)物A的分離純化、結(jié)構(gòu)鑒定、含量測(cè)定 建立了產(chǎn)物A的分離方法。經(jīng)過濃縮、糖沉淀、重結(jié)晶、萃取等分離過程，得到了大量的產(chǎn)物A的粗

3、晶，經(jīng)過多次的重結(jié)晶得到了產(chǎn)物A較純的針狀晶體。 經(jīng)過核磁共振、紅外檢測(cè)等結(jié)構(gòu)鑒定，得到以下數(shù)據(jù)：<'1>H NMR(D<,2>O)δ：8.0168(-0-CH=)，6.5082(-CH=)， 4.4405(-CH<,2>-O)； O<'13>C NMR(D<,2>O)δ： 176.7(-CO-)，168.5(=C-0)，144.6(=C-OH)，142.1(=C-0)，110.6(=C-H)， 59.9(-CH<,2>

4、-O)。紅外數(shù)據(jù)，IR：1074、1472、1582、1612、1691、2924、3098、 3177 cm<'-1>。經(jīng)以上數(shù)據(jù)分析得出結(jié)論：產(chǎn)物A為曲酸(kojic acid)，分子式 C<,6>H<,6>O<,4>，分子量為142。 建立曲酸定量檢測(cè)方法，通過分光光度計(jì)法得到橙皮發(fā)酵液的曲酸產(chǎn)率為0.233％。通過抗菌實(shí)驗(yàn)，證明橙皮發(fā)酵液的抗菌能力增強(qiáng)。 4．發(fā)酵副產(chǎn)物分析 發(fā)酵液中含有多種物質(zhì)，包括多糖

5、、黃酮、新產(chǎn)物橙皮素等。進(jìn)過微生物轉(zhuǎn)化發(fā)酵液中總黃酮含量有大幅度提高，如未發(fā)酵的橙皮水提液黃酮含量為0.0147，孢子接種發(fā)酵后為0.023，發(fā)酵后總黃酮含量提高約56.5％，大劑量的液體種子接種可提高總黃酮含量達(dá)76.9％。 橙皮渣本身就可作為膳食纖維，經(jīng)過微生物轉(zhuǎn)化，其溶張性、持水力都有所提高。未發(fā)酵的橙皮渣溶脹性為3.293，發(fā)酵后為3.853，溶脹性提高了17％；發(fā)酵前橙皮渣持水力為5.27，發(fā)酵后為9.72，持水力提高