全反式維甲酸通過下調(diào)小窩蛋白-1表達和上調(diào)一氧化氮合酶活性改善動脈粥樣硬化兔內(nèi)皮功能.pdf

1、目的:探討全反式維甲酸(All-Trans Retinoic Acid,ATRA)對動脈粥樣硬化兔血管內(nèi)皮功能的影響及與動脈壁小窩蛋白-1(caveolin-1,CAV-1)表達及NOS活性的關系。方法:普通級新西蘭白兔隨機分為3組:A組為正常組;B組為模型組;C組為ATRA干預組。A組給予普通飼料,B、C組給予高脂飼料(普通飼料+1％膽固醇和5%豬油)喂養(yǎng)。12周后,超聲及離體動脈環(huán)實驗檢測各組兔動脈內(nèi)皮依賴性舒張功能(Endothe

2、lial dependent relaxation,EDR)和內(nèi)皮非依賴性舒張功能(non-endothelial dependent relaxation,NEDR),并測定相關血脂變化;免疫熒光檢測動脈內(nèi)膜通透性的變化;石蠟切片HE染色觀察動脈壁的形態(tài)結構,同時用免疫組化檢測動脈壁CAV-1和occludin表達情況; Western blot檢測動脈組織CAV-1和occludin的表達水平;比色法測定NOS活性;硝酸還原酶法檢測

3、動脈壁NO含量變化。結果:超聲與離體動脈環(huán)實驗結果均顯示模型組EDR較正常組明顯下降,而ATRA組EDR與模型組相比明顯改善(P<0.05),三組NEDR無明顯變化;動脈粥樣硬化兔模型復制成功,高脂飲食后血清中甘油三酯(triglyceride,TG),膽固醇(cholesterol,CHO),高密度脂蛋白(high—density lipoprotein,HDL)和低密度脂蛋白(low-density lipoprotein,LDL)

4、含量顯著增加(P<0.05);而加喂ATRA后血清中TG、CHO和LDL含量下降、HDL含量上升(P<0.05)。大體可見模型組兔主動脈明顯粥樣斑塊形成,HE染色顯示內(nèi)膜增厚,細胞間隙增大,內(nèi)膜下大量泡沫細胞形成,ATRA組主動脈內(nèi)膜病變程度減輕;模型組兔免疫熒光顯示主動脈內(nèi)膜通透性與正常對照相比明顯增強,而ATRA組內(nèi)膜通透性較模型組顯著下降;免疫組化和Western blot則顯示動脈內(nèi)皮細胞CAV-1的表達較正常對照相比呈增強趨勢

5、,(P<0.05),而加喂ATRA后CAV-1的表達降低;occludin與CAV-1表達趨勢正好相反;NOS活性和NO含量較正常組明顯降低(P<0.05),而ATRA治療后NOS活性及NO含量明顯增加(P<0.05)。結論:提示在AS發(fā)生發(fā)展過程中,動脈內(nèi)膜結構與功能的改變可能與occludin表達降低、CAV-1表達增加相關。ATRA可能通過下調(diào)模型兔動脈內(nèi)皮細胞CAV-1表達、上調(diào)eNOS活性來改善AS兔動脈內(nèi)皮功能進而抑制AS斑