TSG抑制過(guò)氧化氫誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的:研究二苯乙烯苷(TSG)抑制過(guò)氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)凋亡的分子機(jī)制。
　　方法:體外培養(yǎng)HUVECs,分為三組(對(duì)照組、H2O2處理組、TSG處理組),10μmol/L TSG預(yù)處理HUVECs24h后,300μmol/L H2O2作用HUVECs24h,Hoechst33258染色觀察細(xì)胞凋亡形態(tài),MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖率,流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,RT-PCR檢測(cè)NF-κB與IκB mRNA

2、表達(dá),Western-blotting檢測(cè)NF-κB p65、IκB、bcl-2、p53蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果: Hoechst33258染色觀察,與空白對(duì)照組比,H2O2處理組凋亡細(xì)胞增多,TSG處理組與H2O2處理組比凋亡細(xì)胞明顯減少。MTT結(jié)果顯示,對(duì)照組、H2O2處理組、TSG處理組的增殖率分別為100±4.2％、67.9±3.7%、77.8±3.1%,H2O2降低了細(xì)胞增殖率,與空白對(duì)照組相比,差異有顯著性(P<0.01)

3、;TSG預(yù)處理HUVECs24h后,細(xì)胞增殖率升高,與H2O2組相比,差異有顯著性(P<0.01)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示,三組的凋亡率分別為2.0±0.2%、28.6±3.5%、14.9±3.2%,H2O2組細(xì)胞凋亡率升高,與空白對(duì)照組相比,差異有顯著性(P<0.01);TSG預(yù)處理HUVECs24h后,細(xì)胞凋亡率降低,與H2O2組相比,差異有顯著性(P<0.01)。RT-PCR和Western-blotting結(jié)果顯示:H2O2處理

4、組NF-κB mRNA和蛋白表達(dá)升高,IκB mRNA和蛋白表達(dá)降低,與空白對(duì)照組相比,差異有顯著性(P<0.01),TSG預(yù)處理使NF-κB mRNA和蛋白表達(dá)降低,IκB mRNA和蛋白表達(dá)升高,與H2O2組相比,差異有顯著性(P<0.01)。H2O2作用內(nèi)皮細(xì)胞后p53蛋白表達(dá)升高,bcl-2蛋白表達(dá)降低;與H2O2組相比,TSG預(yù)處理則降低p53蛋白表達(dá)(P<0.05),顯著升高bcl-2蛋白表達(dá)(P<0.01)。
　　結(jié)