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文檔簡介
1、目的:
觀察過氧化氫對大鼠髓核細(xì)胞凋亡影響,探討綠原酸對體外過氧化氫誘導(dǎo)大鼠髓核細(xì)胞凋亡的影響及機(jī)制。
方法:
采用體外培養(yǎng)大鼠髓核細(xì)胞,傳代后取第3代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。過氧化氫組:用終濃度分別為50、100、150、300、600、1200μ mol/L的H2O2誘導(dǎo)凋亡24h后通過流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率,建立誘導(dǎo)凋亡模型。分為4組:(A)正常對照組、(B)綠原酸組(90μ mol/L)、(C)過氧化氫組(
2、600μ mol/L)、(D)綠原酸+過氧化氫組;各組分別給予對應(yīng)處理24h后,通過流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡情況;RT-PCR檢測不同組髓核細(xì)胞Bcl-2和Caspase-3基因表達(dá)。
結(jié)果:
H2O2能成功誘導(dǎo)大鼠髓核細(xì)胞凋亡并呈濃度依賴性,本實(shí)驗(yàn)選取誘導(dǎo)凋亡適宜H2O2終濃度為600μ mol/L;流式細(xì)胞儀檢測各組凋亡率:(A)正常對照組:4.22±2.03%,(B)綠原酸組:7.51±2.68%,(C)過氧化氫
3、組:72.84±9.58%,(D)綠原酸+過氧化氫組:38.79±6.21%。通過檢測結(jié)果可以看出與正常對照組比較,過氧化氫組細(xì)胞凋亡率明顯增高(P<0.05),綠原酸+過氧化氫組細(xì)胞凋亡率較過氧化氫組明顯降低(P<0.05); RT-PCR結(jié)果顯示綠原酸+過氧化氫組Bcl-2mRNA表達(dá)水平較過氧化氫組明顯增強(qiáng)(P<0.05),Caspase-3mRNA表達(dá)水平明顯減弱(P<0.05)。
結(jié)論:
H2O2能成功誘導(dǎo)
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