大鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)CD105的表達(dá)及瑞舒伐他汀干預(yù)后對(duì)斑塊穩(wěn)定性的影響.pdf

1、目的:
　　本研究采用SD(Sprague dawley)雄性大鼠建立動(dòng)脈硬化樣模型，并予瑞舒伐他藥物干預(yù)治療，通過(guò)HE染色、免疫組化的蛋白定量、熒光定量PCR-mRNA檢測(cè)等方法，觀察動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)CD105表達(dá)變化，初步研究CD105對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的作用，并探討瑞舒伐他汀干預(yù)后對(duì)斑塊穩(wěn)定性的影響。
　　方法:
　　1.建立動(dòng)物模型:選擇36只周齡為5-7周，體重為180±20mg的健康清潔級(jí)的SD雄性

2、大鼠，普通飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后，將大鼠采用隨機(jī)抽簽法分為兩組，分別為:對(duì)照組(N=12)和實(shí)驗(yàn)組(N=24)，實(shí)驗(yàn)組予肌注維生素D3+尼古丁灌胃基礎(chǔ)上予高脂飲食，第4周后實(shí)驗(yàn)組隨機(jī)抽簽法分為模型組和藥物干預(yù)組。
　　2.藥物干預(yù)組是使用瑞舒伐他汀鈣片灌胃給藥，每只大鼠按5mg/kg劑量計(jì)算，稀釋于1ml生理鹽水灌胃，每天一次，對(duì)照組與模型組同時(shí)予同等劑量的生理鹽水灌胃。
　　3.第8周末處死所有實(shí)驗(yàn)的大鼠，取出大鼠的胸主動(dòng)脈

3、血管作HE染色，光鏡下觀察大鼠胸主動(dòng)脈血管病理形態(tài)學(xué)特點(diǎn)。應(yīng)用CD105抗體對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血管進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，以明確斑塊局部CD105蛋白表達(dá)情況，應(yīng)用熒光定量PCR檢測(cè)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)CD105-mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果:
　　1.SD大鼠總體生長(zhǎng)健康良好，所有36只大鼠全部完成實(shí)驗(yàn)。所得36只大鼠數(shù)據(jù)參與分析，對(duì)照組12只，模型組12只，藥物干預(yù)組12只。
　　2.病理形態(tài)觀察
　　取大鼠胸主動(dòng)脈作H

4、E染色的結(jié)果顯示:大鼠的胸主動(dòng)脈管壁在對(duì)照組表現(xiàn)為管壁各層結(jié)構(gòu)正常，內(nèi)膜光滑，內(nèi)皮細(xì)胞排列整齊并完整，內(nèi)彈力層清晰完整，中膜可見(jiàn)平滑肌細(xì)胞排列整齊、形態(tài)規(guī)則及彈力纖維正常，無(wú)明顯的斑塊形成;模型組大鼠胸主動(dòng)脈內(nèi)膜可見(jiàn)明顯增厚，內(nèi)膜下可見(jiàn)大量的平滑肌細(xì)胞增生，脂質(zhì)斑塊彌漫，可見(jiàn)大量的泡沫細(xì)胞聚集，并可見(jiàn)典型的不穩(wěn)定斑塊，主要表現(xiàn)為薄纖維帽，較大脂質(zhì)核心，大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。藥物干預(yù)組大鼠胸主動(dòng)脈可見(jiàn)典型的穩(wěn)定斑塊。斑塊表現(xiàn)為較厚的纖維帽，纖

5、維帽完整，脂質(zhì)核心較小，脂質(zhì)核心內(nèi)可見(jiàn)少量的平滑肌細(xì)胞、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　3.免疫組織化學(xué)蛋白定量的結(jié)果
　　免疫組織化學(xué)檢測(cè)結(jié)果顯示，CD105在大鼠胸主動(dòng)脈均可見(jiàn)有表達(dá)，在模型組斑塊內(nèi)可見(jiàn)CD105高表達(dá)，而藥物干預(yù)組斑塊內(nèi)CD105表達(dá)量較模型組減弱，在對(duì)照組大鼠胸主動(dòng)脈可見(jiàn)CD105散在表達(dá)，表達(dá)量較少。本研究最后對(duì)結(jié)果進(jìn)行了定量分析，我們觀察到了模型組CD105表達(dá)與對(duì)照組比較有顯著差異性(P＜0.05)，模型組

6、CD105與藥物干預(yù)組比較有顯著差異性(P＜0.05)，藥物干預(yù)組與對(duì)照組比較有顯著的差異性(P＜0.05)。
　　4.熒光定量PCR結(jié)果
　　CD105-mRNA在各組均檢測(cè)到有表達(dá)，各組CD105-mRNA表達(dá)均有顯著差異的差異性(P＜0.05)，表現(xiàn)為對(duì)照組胸主動(dòng)脈局部CD105-mRNA表達(dá)量最低，模型組CD105-mRNA表達(dá)量最高，藥物干預(yù)組CD105-mRNA表達(dá)含量介于對(duì)照組與模型組之間。
　　結(jié)論:<