基于酶循環(huán)放大技術(shù)檢測腫瘤標記物的研究.pdf

1、近年來，癌癥發(fā)病率不斷增長，造成的死亡人數(shù)逐年增加，已經(jīng)成為嚴重威脅人類生命健康的一類重大疾病。由于對腫瘤等的早期病變?nèi)狈蚀_靈敏的檢測方法，而且現(xiàn)有的檢測手段價格昂貴、操作較為復雜，所以尋找更高效、簡捷的檢測方法對腫瘤的預防、診斷、治療和療效觀察等具有重要的研究價值。本論文主要采用了具有SERS活性的核-殼結(jié)構(gòu)生物條碼探針、納米技術(shù)、滾環(huán)復制的酶循環(huán)放大等技術(shù)，使得檢測信號得到放大，通過表面增強拉曼檢測、電化學檢測等方法，實現(xiàn)了對腫瘤

2、細胞、蛋白質(zhì)、基因和生物活性小分子等腫瘤標記物的高特異性和高靈敏度檢測。以下是論文包含的主要內(nèi)容:
　　1.設計了一種以CdS修飾的生物條形碼-AuNP作為探針，基于雙鏈特異性核酸酶具有極高的選擇性，能識別并剪切完全匹配的DNA雙鏈、雜交的RNA/DNA雙鏈中的DNA，所以DSN特異性選擇和切割使CdS修飾的生物條形碼-AuNP釋放到溶液中。通過生物條碼放大技術(shù)固定CdS納米粒子，結(jié)合陽離子陽極溶出伏安(ASV)預富集技術(shù)顯著提高

3、檢測的靈敏度。該傳感器還可以應用于含有mRNA的樣品檢測中。應用此檢測方法，可以實現(xiàn)mRNA的高靈敏度和高選擇性的測定，得到檢測mRNA的線性范圍是5.0×10-16～1.0×10-10M。線性相關(guān)系數(shù)R2=0.997，檢測限是1.0×10-16M(3σ)使用本傳感器獲得的檢出限低于文獻很多倍。同時對傳感器的選擇性和重復性進行了研究，通過此傳感器，可以實現(xiàn)mRNA的分析和檢測。
　　2.基于生物條碼技術(shù)和酶循環(huán)放大技術(shù)，采用表面拉

4、曼增強技術(shù)，設計了一種高靈敏檢測凝血酶的檢測技術(shù)方法，構(gòu)建了一種新型的DNA循環(huán)信號放大分子生物傳感器，把表面增強拉曼光譜技術(shù)應用到DNA循環(huán)放大的檢測方法中。把核-殼結(jié)構(gòu)作為拉曼信號分子和增強信號的底物，制備了一種攜帶有大量拉曼信號分子的核-殼結(jié)構(gòu)的生物條碼作為拉曼信號探針。在靶DNA的存在下，引發(fā)了DNA的循環(huán)放大和滾環(huán)復制，產(chǎn)生了大量的含有重復序列的DNA長鏈，可與拉曼探針雜交，從而實現(xiàn)了對DNA的循環(huán)放大檢測，并進一步通過檢測凝