連續(xù)性血液凈化對(duì)急性肺損傷患者血清誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞間隙連接通訊功能的影響及其機(jī)制.pdf

1、目的：觀察急性肺損傷（acute lung injury，ALI）患者血清誘導(dǎo)的人Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞（typeⅡ alveolar epithelial cells，ATⅡ細(xì)胞）間隙連接蛋白Connexin43（Cx43）及其mRNA表達(dá)的變化；研究連續(xù)性血液凈化（continuous blood purification，CBP）對(duì)其表達(dá)Cx43及其mRNA的影響和可能機(jī)制。 方法：①分別用健康志愿者清晨空腹血清及重癥急性胰腺炎

2、（severe acute pancreatitis，SAP）伴ALI患者行CBP治療前、治療6h、治療20h時(shí)的血清于體外誘導(dǎo)培養(yǎng)人ATⅡ細(xì)胞（A549細(xì)胞）48h，采用免疫熒光法、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）半定量法檢測(cè)四組細(xì)胞Cx43及其mRNA的表達(dá)；②采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)健康志愿者清晨空腹血清及患者CBP治療不同時(shí)間點(diǎn)血清的腫瘤壞死因子-α（TNF-α）水平，探討其與該血清誘導(dǎo)的ATⅡ細(xì)胞Cx43

3、 mRNA表達(dá)的相關(guān)性。 結(jié)果：①倒置顯微鏡顯示患者CBP治療前血清誘導(dǎo)的ATⅡ細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，呈衰老征象；免疫熒光法及RT-PCR顯示ALI患者行CBP治療前的血清誘導(dǎo)的ATⅡ細(xì)胞Cx43及其mRNA的表達(dá)明顯少于健康對(duì)照組（P<0.01）；②倒置顯微鏡顯示隨患者行CBP治療時(shí)間的延長(zhǎng)，患者血清誘導(dǎo)的ATⅡ細(xì)胞生長(zhǎng)逐漸加快，形態(tài)逐漸恢復(fù)至接近健康對(duì)照組。免疫熒光法及RT-PCR顯示CBP治療6h及20 h時(shí)患者血清誘導(dǎo)的ATⅡ細(xì)

4、胞Cx43及其mRNA的表達(dá)明顯多于治療前組（P<0.01）；CBP治療20 h時(shí)患者血清誘導(dǎo)的ATⅡ細(xì)胞Cx43 mRNA的表達(dá)明顯多于治療6h組（P<0.01）；③ELISA顯示CBP治療前后患者各時(shí)間點(diǎn)血清TNF-α水平均高于健康對(duì)照組，CBP治療6h及20h時(shí)患者血清TNF-α水平明顯低于治療前組（P<0.01）；CBP治療20h時(shí)患者血清TNF-α水平明顯低于治療6h組（P<0.01）；患者血清TNF-α水平與其誘導(dǎo)的ATⅡ細(xì)