大蒜素減低幽門螺桿菌對胃上皮細胞間隙連接通訊功能抑制的研究.pdf

1、目的：觀察體外實驗中幽門螺桿菌(H.pylori)及大蒜素干預對胃上皮細胞系MGC-803細胞Cx37、Cx43mRNA表達和細胞間隙連接通訊功能(GJIC)的影響，明確大蒜素能否減低H.pylori對胃上皮細胞GJIC功能的抑制。 方法：胃上皮細胞系MGC-803細胞體外培養(yǎng)過夜貼壁后，按以下實驗分組：①對照組：不加H.pylori或大蒜素，培養(yǎng)24、48及72h；②大蒜素組：加入大蒜素至終濃度分別為3gg/ml、6μg/ml

2、、9μg/ml、12pg/ml，培養(yǎng)24、48及72h；③H.pylori組：按細菌/細胞100:1加入H.pylori國際標準毒力菌株NCTCJ99(CagA+、VacA+)，培養(yǎng)24h；④先加大蒜素后加H.pylori組：加入大蒜素至終濃度為12ug/ml培養(yǎng)24h后，加NCTCJ99培養(yǎng)24h；⑤先加H.pylori后加大蒜素組：加NCTCJ99培養(yǎng)24h后，加大蒜素至終濃度為12μg/ml培養(yǎng)24h。用RT-PCR法檢測細胞Cx

3、37、Cx43mRNA表達，劃痕標記染料示蹤實驗檢測細胞間隙連接通訊功能，紙片擴散法觀察抑菌環(huán)直徑，MTT法檢測細胞增殖。 結果: (1)對照組：Cx37mRNA有表達，Cx43mRNA無表達，GJIC功能弱。(2)大蒜素組：Cx37mRNA表達較對照組升高(P<0.01)；隨大蒜素濃度增加和作用時間延長，Cx37mRNA表達逐漸升高，各組間差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，Cx43mRNA仍無表達；細胞間隙連接通訊功能改善。

4、(3)H.pylori組：Cx37mRNA表達較對照組降低(P<0.01)，Cx43mRNA仍無表達。(4)先加大蒜素后加H.pylori組和先加H.pylori后加大蒜素組：兩組間Cx37mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，但均較H.pylori組升高(P<0.01)，且GJIC功能改善。(5)大蒜素對H.pylori的抑菌環(huán)直徑均大于7mm，平均為13±3.49mm。(6)大蒜素對MGC-803細胞增殖有抑制作用，呈劑量時