幽門螺桿菌對(duì)人胃上皮細(xì)胞的損傷及抗氧化劑的防護(hù)作用.pdf

1、幽門螺桿菌(Helicobacter pylori)是一種螺旋狀或S狀、微需氧的革蘭氏陰性細(xì)菌，專一性定居于人胃，構(gòu)成人類急、慢性胃炎、消化性潰瘍、胃癌和胃黏膜相關(guān)淋巴樣組織(MALT)淋巴瘤的主要病因。Hpylori在人群中的感染率非常高，達(dá)40％-90％，通常在兒童期感染，而且一經(jīng)感染，若不根除治療，將終生攜帶，攜帶者是H.pylori的傳染源。H.pylori引起胃-十二指腸疾病發(fā)生的機(jī)制涉及細(xì)菌本身致病因子、細(xì)菌黏附與定植、宿主

2、炎癥/免疫反應(yīng)、氧脅迫、細(xì)胞增殖和凋亡等，但是，研究結(jié)果不一致或存在矛盾，迄今，Hpylori的確切致病機(jī)制未有定論。H.pylori相關(guān)疾病的治療普遍采用根除細(xì)菌的抗菌療法，并配以酸抑制劑或鉍制劑。但由于細(xì)菌耐藥性的出現(xiàn)及日益嚴(yán)重，一小部分人治療失敗，抗菌療法受到挑戰(zhàn)。采用非抗生素療法已引起人們的關(guān)注并正在研究中。 本論文選取體外培養(yǎng)的人胃上皮細(xì)胞SGC-7901作為模型，從細(xì)胞增殖和氧脅迫的角度探討Hpylori的致病機(jī)制。

3、采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法、XTT試驗(yàn)和BrdU摻入試驗(yàn)測(cè)定H.pylori對(duì)細(xì)胞存活和增殖的影響；分別用彗星電泳和DNA片段化ELISA測(cè)定DNA損傷；用o-鄰苯二醛熒光法測(cè)定GSH水平：用基于DCFH-DA熒光染料的流式細(xì)胞儀測(cè)定ROS的產(chǎn)生。同時(shí)研究抗氧化劑維生素C、亞硒酸納、葉酸、丁基羥基苘香醚、乙醇以及常見的兩種抗氧化酶過氧化氫酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)對(duì)H.pylori引起的細(xì)胞損傷的防護(hù)作用。 結(jié)果：(1)H.py

4、lori以感染劑量和時(shí)間依賴性地抑制了胃細(xì)胞的存活和增殖。同時(shí)，H.pylori以感染劑量和時(shí)間依賴性地降低胃細(xì)胞GSH水平，刺激胃細(xì)胞產(chǎn)生ROS，使胃細(xì)胞處于氧脅迫狀態(tài)。H.pylori還以感染劑量和時(shí)間依賴性地使胃細(xì)胞DNA鏈斷裂和片段化，損傷了DNA。H.pylori引起的細(xì)胞DNA損傷與ROS增多正相關(guān)，但與GSH減少和細(xì)胞增殖負(fù)相關(guān)。提示氧脅迫及其介導(dǎo)的DNA損傷可能是H.pylori致病的一種機(jī)制。 (2)抗氧化劑維

5、生素C、亞硒酸鈉和葉酸以及抗氧化酶CKT和SOD對(duì)H.pylori感染引起的GSH減少、ROS增多、DNA損傷均有顯著的防護(hù)作用。但是具有抗氧化作用的食物添加劑丁基羥基茴香醚對(duì)H.pylori相關(guān)損傷既無防護(hù)作用，也無毒性。作為抗氧化劑的乙醇對(duì)H.pylori引起的ROS增多和DNA損傷無防護(hù)作用，還降低了GSH水平。抗氧化劑的防護(hù)作用從另一方面證明H.pylori的氧脅迫致病機(jī)制，并提示采用抗氧化劑治療H.pylori相關(guān)疾病是對(duì)癥的