大豆干旱應(yīng)激相關(guān)基因的克隆及分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究利用RT-PCR和3'race技術(shù)從大豆中克隆了一條干旱脅迫應(yīng)激相關(guān)序列,并對其進(jìn)行了生物信息學(xué)分析,選取了7份不同大豆材料,苗期用20%PEG6000進(jìn)行模擬干旱脅迫處理,利用半定量RT-PCR方法測定處理后1~6 d該干旱應(yīng)激相關(guān)基因的表達(dá)量變化,并測定干旱脅迫后1~6 d的超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)活性和游離脯氨酸(Pro)、可溶性糖(WSS)、葉綠素和丙二醛(MDA)含量等6個生理生化指標(biāo)的變化情況,以

2、期研究不同大豆類型中該基因表達(dá)量、相關(guān)生理生化指標(biāo)隨干旱脅迫時間的變化趨勢,探討抗旱機(jī)制,為野生大豆抗旱種質(zhì)資源利用、大豆抗旱育種提供理論依據(jù)。本研究得出以下結(jié)論:
  1.獲得了大小為3375 bp的大豆干旱應(yīng)激相關(guān)基因序列,并在GenBank上注冊,登錄號為KJ017967。利用生物信息學(xué)方法對所克隆得到的基因序列及其編碼蛋白進(jìn)行分析,得出該基因序列為Ty3-gypsy型反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的pol蛋白編碼基因序列,其包含三個開放閱讀

3、框,長度為597 bp、543 bp和951 bp,分別編碼198、180和316個氨基酸,編碼的3個蛋白依次為反轉(zhuǎn)錄酶、RNaseH和整合酶,將3個基因分別命名為GmRT、GmRNaseH和GmINT。
  2.建立了該干旱應(yīng)激相關(guān)基因的半定量RT-PCR體系,該基因在干旱脅迫下表達(dá)量增加,干旱脅迫1~6 d中表達(dá)量呈先升后降再升高最后降低的變化趨勢,表明干旱脅迫誘導(dǎo)了該轉(zhuǎn)座子基因的表達(dá)。
  3.在干旱脅迫下,不同材料大

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