抗性相關(guān)大豆miRNA的克隆和表達(dá)特征分析.pdf

1、microRNA(miRNA)是一類(lèi)結(jié)構(gòu)相當(dāng)保守、長(zhǎng)度約為21個(gè)核苷酸的內(nèi)源單鏈非編碼RNA，可通過(guò)調(diào)控細(xì)胞中與某信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑相關(guān)mRNA，指導(dǎo)靶基因的切割或降低靶基因的翻譯，在轉(zhuǎn)錄后水平抑制植物基因表達(dá)，從而影響植物形態(tài)發(fā)生、發(fā)育過(guò)程、適應(yīng)環(huán)境的能力和激素信號(hào)傳導(dǎo)等，是一種新的基因調(diào)控模式。 從2002年證實(shí)miRNA在植物中的存在以來(lái)，關(guān)于植物miRNA的研究進(jìn)展異常迅速，短短幾年內(nèi)就已發(fā)現(xiàn)了200多種。植物在進(jìn)化過(guò)程中為了

2、適應(yīng)各種環(huán)境產(chǎn)生了復(fù)雜的適應(yīng)機(jī)制，體現(xiàn)在分子水平上主要通過(guò)轉(zhuǎn)錄水平和轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控眾多相關(guān)基因的表達(dá)來(lái)抵抗各種環(huán)境脅迫。如機(jī)械力、干旱、鹽堿、低溫等非生物脅迫在轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后調(diào)控植物特定基因的表達(dá)，這些基因的表達(dá)反過(guò)來(lái)又賦予植物抗逆性。 面對(duì)我國(guó)大豆生產(chǎn)普遍存在嚴(yán)重影響大豆產(chǎn)量和品質(zhì)(鹽、旱、病蟲(chóng)等)等關(guān)鍵問(wèn)題，本研究將利用我國(guó)優(yōu)異的大豆種質(zhì)資源，發(fā)掘與抗逆相關(guān)的miRNA，鑒定miRNA調(diào)控靶基因的調(diào)節(jié)模式及所參與的信號(hào)通路。研

3、究這些miRNA對(duì)抗逆的影響，將構(gòu)建我國(guó)大豆抗逆miRNA研究的技術(shù)平臺(tái)，為大豆的遺傳改良、基因發(fā)掘提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)支撐，填補(bǔ)大豆miRNA研究的空白。 本文通過(guò)檢索大豆miRNA數(shù)據(jù)庫(kù)，獲得通過(guò)生物信息學(xué)方法預(yù)測(cè)的大豆miRNA序列，通過(guò)克隆、測(cè)序的方法獲得了已預(yù)測(cè)的11條miRNA的成熟序列。 根據(jù)miRNA與mRNA互補(bǔ)的特性，以miRNA成熟序列為關(guān)鍵詞搜索miRNA的靶基因，通過(guò)10次測(cè)序驗(yàn)證了miRNA15