馬鈴薯青枯病抗性相關(guān)基因的克隆及表達(dá)模式分析.pdf

1、馬鈴薯(Solanum tuberosum L.)是繼小麥、玉米、水稻之后的世界第四大作物，在世界的食品安全體系中具有重要的作用。由青枯病菌Ralstonia solanacearum引起的馬鈴薯青枯病是僅次于馬鈴薯晚疫病的世界性病害，目前尚沒有行之有效的化學(xué)藥劑防治辦法，嚴(yán)重影響了馬鈴薯的生產(chǎn)。培育抗病品種已成為防治馬鈴薯青枯病的根本手段。長期以來人們對馬鈴薯青枯病的研究和探討主要集中在病菌的病理學(xué)機(jī)制、分類學(xué)、流行病學(xué)等方面，而在馬

2、鈴薯本身的抗病遺傳特性、馬鈴薯青枯病抗性相關(guān)基因的種類、數(shù)量及其表達(dá)調(diào)控途徑等方面還不清楚。通過馬鈴薯青枯病抗性相關(guān)基因的分離和分析，初步揭示參與青枯病抗性的基因種類與數(shù)量，為進(jìn)一步深入開展青枯病的抗病機(jī)制研究及利用抗性資源進(jìn)行抗病品種選育奠定基礎(chǔ)。
　　 本研究以馬鈴薯(Solanum tuberosum L.)葉片為材料，應(yīng)用RT-PCR及RACE的方法首次克隆四個馬鈴薯抗青枯病相關(guān)基因的全長cDNA序列，并對其表達(dá)模式進(jìn)行

3、了分析。具體為：
　　 SFA22(RIN4-like)編碼150個氨基酸，該基因與擬南芥RIN4的部分核苷酸序列具有67％的一致性，與其編碼的氨基酸序列具有35％的一致性，暫命名RIN4-like。半定量RT-PCR結(jié)果表明，該基因不受青枯病菌的誘導(dǎo)和水楊酸等多種脅迫的調(diào)節(jié)，或許是僅在脅迫中發(fā)揮作用，或者具有不受水楊酸和青枯菌脅迫誘導(dǎo)的抗性作用途徑。
　　 L362(Pti1-like)編碼366個氨基酸，該基因與大豆

4、編碼的Protein kinase基因的氨基酸序列具有87％的一致性，與蓖麻的Protein kinase基因的部分核苷酸序列具有80％的一致性，暫命名為Pti1-like。半定量RT-PCR結(jié)果表明，該基因同時受水楊酸等多種脅迫的調(diào)節(jié)，均為上調(diào)表達(dá)。Pti基因?yàn)閜to基因的下游基因，參與番茄的抗病反應(yīng)，推測L362也可能參與了馬鈴薯的抗青枯病反應(yīng)。
　　 L221(nam-like protein4-like)編碼401個氨基

5、酸，該基因與petunia× hybrida nam-like protein4(NH4)mRNA的核甘酸序列有87％的一致性。與其氨基酸序列有86％的一致性。暫命名為nam-like protein4-like。該基因也不受青枯病菌的誘導(dǎo)和水楊酸等多種脅迫的調(diào)節(jié)，或許是僅在脅迫中發(fā)揮作用，或者具有不受水楊酸和青枯菌脅迫誘導(dǎo)的抗性作用途徑。
　　 L77(proteinase inhibitorⅡ-like)編碼155個氨基酸，