馬鈴薯晚疫病水平抗性相關(guān)基因中未知功能基因的定位.pdf

1、馬鈴薯（Solanum tuberosum L．）是世界上四大糧食作物之一，地位僅次于水稻、小麥和玉米。中國(guó)是最大的馬鈴薯生產(chǎn)國(guó)。由致病疫霉菌（Phytophthora infestans）引起的晚疫病是馬鈴薯全球范圍內(nèi)的毀滅性病害，嚴(yán)重地制約了馬鈴薯的生產(chǎn)和發(fā)展。最初人們使用化學(xué)藥劑進(jìn)行防治，取得了一定的成效，但是化學(xué)藥劑不僅價(jià)格昂貴，而且還對(duì)環(huán)境造成了一定的污染。因此，培育抗性品種成為晚疫病防治的最有效途徑。由主效基因控制的馬鈴薯晚

2、疫病垂直抗性并不持久，因?yàn)樾庐a(chǎn)生的小種會(huì)迅速克服這種單基因抗性。與垂直抗性相反，水平抗性是由微效多基因控制的數(shù)量性狀，具水平抗性的品種雖會(huì)發(fā)生一定程度的病害，但沒(méi)有病原小種的特異性，對(duì)品質(zhì)和產(chǎn)量影響較小，抗性較為持久，且對(duì)晚疫病菌的選擇壓小，可以延緩病原菌的變異。因此，培育抗晚疫病的水平抗性品種已成為目前全球抗晚疫病育種的趨勢(shì)?？刂扑娇剐曰虻膹?fù)雜性與病原菌和環(huán)境的復(fù)雜互作，以及馬鈴薯栽培種本身的四體性遺傳，使得水平抗性育種十分困難。

3、
　　 本研究從實(shí)驗(yàn)室已鑒定的348個(gè)馬鈴薯晚疫病水平抗性相關(guān)基因EST中篩選未知功能基因的EST，通過(guò)群體多態(tài)性檢測(cè)進(jìn)行基因定位，根據(jù)定位情況預(yù)測(cè)其功能，從而為開(kāi)發(fā)馬鈴薯晚疫病抗性相關(guān)的分子標(biāo)記奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：
　　 1．本研究從實(shí)驗(yàn)室已鑒定的348個(gè)EST篩選了與馬鈴薯晚疫病水平抗性相關(guān)的未知功能基因的EST35個(gè)。
　　 2．根據(jù)己知的EST序列設(shè)計(jì)特異引物，同時(shí)檢測(cè)這些引物在兩個(gè)二倍體馬鈴薯群

4、體中的多態(tài)性。本實(shí)驗(yàn)選用的兩個(gè)群體都是回交群體，分別是BCT群體和PCC1群體。多態(tài)性結(jié)果顯示，2個(gè)標(biāo)記在PCC1群體中有多態(tài)性，5個(gè)標(biāo)記在BCT群體中有多態(tài)性。
　　 3．將具有多態(tài)性的7個(gè)標(biāo)記回收、測(cè)序，然后在NCBI上進(jìn)行Blast分析。結(jié)果表明，6個(gè)為目標(biāo)基因，分別是DR751788、DR751719、DR751998、DR752001、DR752011和DR751984，1個(gè)為非目標(biāo)基因。
　　 4．用作圖軟件