PP2A對大鼠脊髓損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移和神經(jīng)軸突生長的調(diào)節(jié)研究.pdf

1、目的：蛋白磷酸酯酶2A（PP2A）是哺乳動物細(xì)胞中一種主要的絲氨酸-蘇氨酸磷酸酯酶，大量存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)中。但其在中樞系統(tǒng)損傷中的作用仍不清楚。本文旨在研究PP2A對大鼠脊髓損傷后星形膠質(zhì)細(xì)胞遷移和神經(jīng)軸突生長的調(diào)節(jié)作用，從而明確其修復(fù)脊髓損傷的內(nèi)在機(jī)制。
　　方法：采用Allen法建立SD大鼠脊髓損傷模型，BBB量表評分大鼠判定脊髓損傷程度。造模成功后，無菌條件分離和培養(yǎng)背根神經(jīng)元細(xì)胞及小腦顆粒神經(jīng)元，免疫熒光染色后檢測神經(jīng)軸

2、突生長情況。對損傷脊髓進(jìn)行石蠟切片處理，對切片行免疫熒光染色，激光共聚焦顯微鏡下觀察PP2A表達(dá)情況。同時(shí)V2460法檢測PP2A磷酸化水平檢測，評價(jià)PP2A活性。將PP2A載體質(zhì)粒轉(zhuǎn)染N2a細(xì)胞，V2460法檢測PP2A活性及Western blot法檢測PP2A蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果：在研究中，在脊髓損傷（SCI）后，Tyr-307磷酸化PP2A（PP2A的非活性形式）的表達(dá)迅速上調(diào)。此外，在培養(yǎng)的神經(jīng)元中高表達(dá)的硫酸軟骨素