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文檔簡介
1、目的:觀察體外條件下趨化因子CXCL-8、CXCL-16對大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞遷移的趨化作用。 方法:采用全骨髓法培養(yǎng)成年Wistar大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞,取第5代骨髓基質(zhì)細(xì)胞行流式細(xì)胞儀鑒定;然后通過細(xì)胞免疫熒光及RT-PCR的方法檢測骨髓基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)趨化因子受體CXCR1、CXCR6的情況,利用Transwell小室法探討趨化因子CXCL-8、CXCL-16對骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外趨化作用及其特異性。 結(jié)果:第5代骨髓基質(zhì)細(xì)胞的
2、表面抗原CD29的陽性率為99.18%, CD45的陽性率為4.35%;骨髓基質(zhì)細(xì)胞趨化因子受體CXCR1和CXCR6呈陽性表達(dá),位于細(xì)胞膜和細(xì)胞漿中,RT-PCR瓊脂糖凝膠電泳后分別出現(xiàn)215 bp、342bp特異性擴(kuò)增條帶。與對照組比較,加入5~500 ng/ml趨化因子CXCL-8或CXCL-16后,骨髓基質(zhì)細(xì)胞遷移數(shù)均明顯增加(P<0.05)。加入抗CXCR1或CXCR6多克隆抗體后,骨髓基質(zhì)細(xì)胞遷移數(shù)較250 ng/ml趨化因
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