促紅細(xì)胞生成素對(duì)缺氧缺血新生鼠腦組織保護(hù)作用的研究.pdf

1、目的:探討體外注射重組人促紅細(xì)胞生成素(recombinant human erythropoietin，RhEPO)對(duì)新生鼠缺氧缺血后腦組織超氧化物歧化酶(super oxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA).、一氧化氮(nitric oxide，NO)水平以及對(duì)腦細(xì)胞凋亡的影響，闡明其對(duì)新生鼠缺氧缺血腦損傷(hypoxic-ischemic brain damage，HIBD)的保護(hù)

2、作用。 方法:1.新生鼠缺氧缺血腦損傷(HIBD)模型分組及制備：7日齡Wistar大鼠101只，隨機(jī)分成3組，假手術(shù)組(n=25)、對(duì)照組（生理鹽水組）(n=38)、實(shí)驗(yàn)組（RhEPO組）(n=38)。對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組分別結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈，缺血術(shù)后恢復(fù)3h，置于2000ml常溫常壓缺氧艙內(nèi)，以2-3L/min的速度輸入含8％氧氣和92％氮?dú)獾幕旌蠚怏w，持續(xù)2h，建立HBID的動(dòng)物模型。模型制備后對(duì)照組即刻腹腔注射生理鹽水0.5m

3、l/只，實(shí)驗(yàn)組腹腔注射RhEPO4000 U/ kg，稀釋到0.5ml。假手術(shù)組僅游離右側(cè)頸總動(dòng)脈，不結(jié)扎，不低氧處理。2.新生鼠缺氧缺血腦損傷(HIBD)模型的觀察：假手術(shù)組于處置后、對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組于注射藥物后2h、12h、24h、48h、72h、96h斷頭取右側(cè)腦組織，按重量體積比1：9加生理鹽水用玻璃研磨制成10％腦組織勻漿，置于低溫離心機(jī)中，以3000r/min離心10min，然后取腦組織勻漿上清液，用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)蛋白含量，硫

4、代巴比妥酸法測(cè)定MDA的含量，黃嘌呤氧化酶法測(cè)定SOD，硝酸還原酶法測(cè)定NO，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。同時(shí)三組大鼠分別于術(shù)后24h選右側(cè)腦取丘腦1/3平面行冠狀切面，4％多聚甲醛固定，制作石蠟切片，行HE染色及Tunel染色，光鏡下觀察細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果:對(duì)照組與假手術(shù)組比較SOD明顯降低，2～96h差異有顯著性意義(P<0.01)，而MDA值明顯增高，2～72h差異有顯著性意義(P<0.01)，NO2h顯著升高(P<0.05)，1

5、2-96h差異有顯著性意義(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較，SOD明顯升高，12～96h差異有顯著性意義(P<0.01)，而MDA明顯降低，24～72h差異有顯著性意義(P<0.01)，NO明顯降低，24-96h差異有顯著性意義(P<0.01)。HE染色及Tunel染色對(duì)照組海馬CA1區(qū)凋亡細(xì)胞數(shù)明顯高于實(shí)驗(yàn)組。 結(jié)論:重組人促紅細(xì)胞生成素可升高新生鼠缺氧缺血腦組織的SOD、降低MDA，改善缺氧缺血腦組織自由基導(dǎo)致的脂質(zhì)過氧