RAGE在SAP大鼠胰腺和腎臟中的表達(dá)及其作用的研究.pdf

1、【目的】探討RAGE在SAP大鼠胰腺和腎臟中的表達(dá)及其在SAP大鼠胰腺和腎臟損傷中的作用,研究QYG對RAGE在SAP大鼠胰腺和腎臟中表達(dá)的影響及其可能機(jī)制。
　　【方法】80只SD(Sprague-Dawley)大鼠隨機(jī)分成4組:
　?、賁AP組(24只)；
　　②QYG治療組(24只)；
　　③假手術(shù)(sham-operation,SO)組(24只)；
　?、苷φ战M(8只)。
　　前三組分別按

2、12h、24h和48h3個時間點隨機(jī)處死8只;第①、②兩組逆行胰膽管注射5％?；悄懰徕c(sodium taurocholate,STC)(0.1ml/100g)建立大鼠SAP模型,第③組逆行胰膽管注射生理鹽水(0.1ml/100g);所有組于造模成功后雙下肢外側(cè)皮下予補(bǔ)充生理鹽水(1ml/100g體重);第②組造模后2h,QYG溶解后灌胃1ml/100g體重,此后每隔12h給藥1次,第①、③組以生理鹽水替代QYG。分別于給藥前后測腎臟干

3、濕重比及體重系數(shù),人工碘比色法測血清淀粉酶(amylase,AMS),丙二醛(Malondialdehyde,MDA)試劑盒測血清MDA濃度,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)試劑盒測血清SOD活力,酶聯(lián)免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)試劑盒測血清TNF-α、IL-2和IL-6濃度,免疫組化法測胰腺和腎臟組織中RAGE蛋白表達(dá)情況,western

4、blot測胰腺、腎臟組織中RAGE表達(dá)水平,RT-PCR法測胰腺、腎臟中RAGE-mRNA表達(dá)水平。
　　【結(jié)果】(1)第①、②組胰腺、腎臟均出現(xiàn)不同程度的炎性細(xì)胞浸潤,組織充血、水腫,甚至出血、壞死,細(xì)胞間結(jié)構(gòu)破壞,第②組予QYG治療后病理評分顯著低于第①組(P<0.05);第③、④組胰腺、腎臟無明顯變化。
　　(2)第①、②組大鼠胰腺、腎臟干濕重比較第③、④組小(P<0.05),第②組經(jīng)QYG治療后,干濕重比上升,治療4

5、8h后與相應(yīng)時間第③組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　(3)第①組大鼠腎臟系數(shù)比后三組均小,組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P﹥0.05)。
　　(4)第①、②兩組大鼠血清AMS、MDA水平均明顯高于第③組,第②組QYG治療后血清AMS和MDA含量明顯降低(P<0.05),12h、24h和48h三個時間點呈逐漸下降趨勢;第①、②組血清總SOD含量均明顯低于第③組,治療后第②組較第①組升高,12h內(nèi)升高無統(tǒng)計學(xué)差異,24h后升高顯著(

6、P<0.05)。
　　(5)第①、②組血清IL-6和TNF-α含量均高于第③組,以第②組明顯,24h達(dá)到峰值,48h開始回落,而血清IL-2含量則呈現(xiàn)相反表現(xiàn),QYG的療效呈時間依賴性,IL-2和TNF-α呈負(fù)相關(guān)(r=-0.873),IL-6和TNF-α呈負(fù)相關(guān)(r=-0.897),IL-6與TNF-α二者之間呈正相關(guān)(r=0.931)。
　　(6)第①、②組大鼠胰腺和腎臟組織中可見大量RAGE陽性表達(dá)細(xì)胞,RAGE陽性的

7、表達(dá)量與病變嚴(yán)重程度正相關(guān),第②組經(jīng)QYG治療后胰腺、腎臟中RAGE蛋白表達(dá)量較第①組減少,免疫印跡和RT-PCR結(jié)果變化趨勢相近。
　　(7)QYG治療SAP療效具有時間依賴性。
　　(8)經(jīng)統(tǒng)計相關(guān)分析,胰腺和腎臟組織中RAGE表達(dá)量與IL-6為正相關(guān)(r=0.865,P<0.05),與TNF-α為正相關(guān)(r=0.879,P<0.05),與IL-2負(fù)相關(guān)(r=-0.794,P<0.05)。
　　【結(jié)論】(1)SAP

8、模型大鼠血清中淀粉酶水平明顯升高,提示大鼠SAP模型建立成功。
　　(2)SAP時大鼠胰腺和腎臟組織中大量表達(dá)RAGE,RAGE可能參與了SAP大鼠胰腺和腎臟的病理損傷。
　　(3)氧化應(yīng)激參與SAP的發(fā)生發(fā)展過程,SAP可降低機(jī)體抗氧化能力。
　　(4)QYG可下調(diào)SAP大鼠胰腺和腎臟組織中RAGE蛋白和RNA的表達(dá),二者病理損傷減輕,提示QYG具有保護(hù)SAP大鼠胰腺和腎臟免受損傷的作用。
　　(5)QYG對S