SHP2在喉癌中的表達(dá)及其生物學(xué)作用研究.pdf

1、目的:
　　明確臨床喉癌樣本中SHP2的表達(dá)水平及其與喉癌患者預(yù)后的關(guān)系，評(píng)價(jià)SHP2作為喉癌預(yù)后判斷指標(biāo)的價(jià)值。探討SHP2對(duì)喉癌細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為的影響。
　　方法:
　　利用Real-Time PCR、western-blot和免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)喉癌臨床組織樣品中SHP2的表達(dá)情況并運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析SHP2的表達(dá)與臨床病理和預(yù)后資料的相關(guān)性;在體外實(shí)驗(yàn)，利用慢病毒感染的方法建立干擾SHP2的

2、喉癌Hep2細(xì)胞系及其對(duì)照細(xì)胞系;利用Hep2-shSHP2及其對(duì)照細(xì)胞系分別采用增殖實(shí)驗(yàn)、穿膜實(shí)驗(yàn)和侵襲實(shí)驗(yàn)等方法觀察干擾SHP2表達(dá)后對(duì)喉癌細(xì)胞系增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移能力等生物學(xué)行為的影響;在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，將上述穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系接種裸鼠，觀察SHP2對(duì)喉癌細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤能力的影響。
　　結(jié)果:
　　1、從轉(zhuǎn)錄水平、蛋白水平和組織學(xué)水平證實(shí)SHP2在喉癌細(xì)胞中表達(dá)顯著高于癌旁，在喉癌的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中SHP2的表達(dá)尤為增高。
　　

3、2、通過對(duì)帶有詳細(xì)病理資料和預(yù)后情況的喉癌組織芯片進(jìn)行SHP2的免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)并評(píng)分，統(tǒng)計(jì)分析得出喉癌中SHP2表達(dá)與預(yù)后呈負(fù)相關(guān)，SHP2表達(dá)水平越高，患者總體生存期越差。
　　3、通過增殖實(shí)驗(yàn)、穿膜實(shí)驗(yàn)和侵襲實(shí)驗(yàn)等分子生物學(xué)方法發(fā)現(xiàn)，干擾SHP2表達(dá)后喉癌細(xì)胞系生長能力、侵襲能力和遷移能力明顯減弱。
　　4、通過體內(nèi)荷瘤實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)干擾Shp2后裸鼠腫瘤形成能力明顯低于對(duì)照組。
　　結(jié)論:
　　本課題研究首