SLE患者Tfh細胞產(chǎn)生機制初步研究.pdf

1、目的：研究系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者外周血中CXCR5+PD1+/CD4+T淋巴細胞(即濾泡輔助性T細胞，Tfh)的百分比及與健康對照相比的變化情況，分析其與SLE疾病活動指數(shù)(SLEDAI)、自身抗體及臨床指標的相關(guān)性，探討其在SLE發(fā)病機制中的作用。
　　方法：收集20例活動期、21例非活動期SLE患者及22例健康對照外周血，分離外周血單個核細胞(PBMC)，標記流式抗體(CD4、PD1、CXCR5)，以鼠抗人IgG1作為P

2、D1同型對照，采用流式細胞術(shù)檢測CXCR5+PD1+T細胞占CD4+T細胞的百分比。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清中抗核抗體(ANA)、抗ds-DNA的表達。以大于健康對照X+2s為界，將SLE患者分為Tfh細胞高表達組和低表達組，并根據(jù)臨床癥狀或?qū)嶒炇覚z查結(jié)果比較兩組間的差異。不同組間行Mann-Whitney或Fisher’s exact檢驗；Tfh細胞比例與SLEDAI的相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析法，以p<0.05為差

3、異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：SLE患者PBMC中Tfh細胞的百分比高于健康對照組(p<0.05)，其中活動組顯著高于對照組(p<0.05)，而非活動組與對照組之間差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。Tfh細胞百分比與SLEDAI、ANA呈正相關(guān)(p<0.05)。與Tfh細胞低表達組相比，高表達組與抗-SSA相關(guān)(p<0.05)，而與其他臨床及實驗室指標無相關(guān)(p>0.05)。
　　結(jié)論：SLE患者外周血中Tfh細胞比例升高，并

4、與SLEDAI、ANA呈正相關(guān)，Tfh細胞高表達組與抗-SSA相關(guān)，提示這類細胞參與SLE發(fā)病并在疾病的活動過程中起作用。
　　目的：通過體外實驗觀察白細胞介素-21(IL-21)及地塞米松(Dex)對Tfh細胞表達的調(diào)控作用并初步探討其可能的機制。
　　方法：收集11例SLE患者外周血，分離PBMC，分對照組、rIL-21組及rIL-21+Dex組(rIL-21濃度為200ng/μL、Dex濃度為1×10-6M/L)體外分

5、別培養(yǎng)24、72小時；另分離20例SLE患者PBMC，分對照組及Dex組(Dex濃度分別為5×10-7、1×10-6M/L，)體外培養(yǎng)24小時(每組細胞數(shù)相同，平均約106個/孔)，上述樣本均標記CD4、PD1、CXCR5，檢測PBMC中Tfh的百分比。ELISA檢測上清中ANA的表達。Mann-Whitney秩和檢驗行組間差異比較，以p<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：與對照組相比，體外培養(yǎng)24h后rIL-21組Tfh細

6、胞的百分比顯著升高，差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)；與rIL-21組相比，培養(yǎng)24h后rIL-21+Dex組Tfh細胞的百分比有所下降但仍高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)，然而培養(yǎng)72h無差異(p>0.05)；Dex組顯著降低Tfh細胞的百分比，并具有濃度依賴性(p<0.05)。各組上清中ANA差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。
　　結(jié)論：IL-21能夠促進SLE患者Tfh細胞的表達，Dex對SLE患者Tfh細胞的表

7、達具有抑制作用，并且Dex對IL-21促進的Tfh細胞的表達起抑制作用。
　　目的：研究骨形態(tài)發(fā)生蛋白(Bone Morphogenetic Protein，BMP)通路相關(guān)微小RNA-21、-155(miR-21、miR-155)在SLE中的表達情況及與SLE臨床相關(guān)疾病指標的關(guān)聯(lián)，探討miRNA與疾病表現(xiàn)及自身抗體產(chǎn)生的關(guān)系，推測其在SLE發(fā)病機制中的作用。
　　方法：收集59例SLE患者和25例健康對照外周血，分離PB

8、MC，Trizol法提取總RNA，逆轉(zhuǎn)錄過程中加polyA尾，以實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)進行檢測。根據(jù)臨床癥狀或?qū)嶒炇覚z查結(jié)果將SLE患者分組，不同組間行Mann-Whitney秩和檢驗，以p<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)果：與健康對照組相比活動組SLE患者miR-21及miR-155表達水平均升高(p<0.05)，而非活動組無顯著差異；抗ds-DNA(+)組SLE患者miR-21、miR-155表達水平顯著