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文檔簡介
1、飼料中添加過高劑量油脂,其能量利用率較低,長期飼喂還會(huì)引起高血脂、肥胖等相關(guān)疾?。谎芯堪l(fā)現(xiàn),高脂日糧易引起氧化應(yīng)激,油脂的氧化可能是影響飼料利用率和導(dǎo)致高血脂的重要原因。本論文著重研究了高脂日糧中添加半胱胺,對(duì)動(dòng)物機(jī)體抗氧化能力和血脂的影響,并初步探討了半胱胺與清除自由基,保護(hù)肝細(xì)胞DNA完整性,及其與ATPase活性的關(guān)系。 KM斷奶雄性小鼠(17.28g左右)90只,分為9組,在基礎(chǔ)目糧及高脂日糧(添加4%、8%豬油)基礎(chǔ)上
2、,分別添加0、24、48mg/kg半胱胺,飼喂90天。實(shí)驗(yàn)觀察到:連續(xù)飼喂高脂日糧會(huì)降低小鼠機(jī)體的抗氧化能力,提高血脂含量。在日糧中添加24、48mg/kg半胱胺可提高小鼠血清和肝、腸勻漿液中超氧化岐化酶活性和谷胱甘肽含量,提高小鼠血清和肝、腸組織的O<'2->和OH·自由基清除率和總抗氧化能力,降低丙二醛含量。并且,高脂日糧中添加半胱胺能降低T-CHO和LDL,提高HDL。分析得到血清中總膽固醇與肝臟的總抗氧化能力存在顯著的負(fù)相關(guān)關(guān)系
3、(P<0.01),相關(guān)系數(shù)為-0.823。 建立小鼠肝細(xì)胞氧化模型,通過給小鼠原代肝細(xì)胞添加油酸至終濃度為0、50、100、150、200、250μmol/L,以ROS生成量和谷胱甘肽含量為主要指標(biāo),以ATPase活性和丙二醛產(chǎn)物為次要指標(biāo),得到建立氧化模型的油酸添加量為150μmol/L。選取油酸添加0、150、250μmol/L,同時(shí)添加CS至終濃度為0、50、100、150、200、250、300、350、400、450、
4、500μmol/L。實(shí)驗(yàn)表明,少量添加半胱胺能顯著提高谷胱甘肽含量,清除ROS,降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛,提高細(xì)胞中ATPase活性;且隨著油酸添加量的增加,半胱胺最佳清除ROS添加量與ATPase活性提高程度也隨之增加,ROS清除率最大為78.35%,ATPase活性最大提高了116.58%。但半胱胺添加量大于350μmol/L時(shí),對(duì)小鼠肝細(xì)胞抗氧化能力的提高不利。通過對(duì)肝細(xì)胞培養(yǎng)液中添加油酸250μmol/L建立氧化損傷模型。用單細(xì)
5、胞凝膠電泳分析小鼠肝細(xì)胞DNA損傷情況。觀察到在肝細(xì)胞培養(yǎng)液中添加半胱胺150、300μmol/L能顯著降低小鼠肝細(xì)胞氧化DNA拖尾百分率,提高細(xì)胞DNA損傷抑制率(由28.7396上升到63.33%)。 結(jié)論:高脂日糧中添加半胱胺能顯著提高肝臟的抗氧化能力,維持肝臟中脂肪代謝的穩(wěn)定,降低血脂,減少腹腔脂肪的沉積。體外實(shí)驗(yàn)也表明,添加半胱胺能提高肝細(xì)胞的抗氧化能力,清除油酸誘導(dǎo)生成的自由基,保護(hù)肝細(xì)胞的DNA的完整性,提高ATP
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