酯酰輔酶A：膽固醇?；D(zhuǎn)移酶1(ACAT1)基因多態(tài)性與漢族人冠心病相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景:酯酰輔酶A:膽固醇?；D(zhuǎn)移酶1(Acy1 Coenzyme A:Cholesterol Acyltransferases1，ACAT1)是一種膽固醇催化酶，主要在將細(xì)胞內(nèi)的游離膽固醇酯化成為膽固醇酯的過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵酶的作用，并以酯滴的形式將膽固醇酯儲(chǔ)存在細(xì)胞內(nèi)，因此具有調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞細(xì)胞內(nèi)膽固醇代謝的作用。ACAT1可增加細(xì)胞內(nèi)膽固醇的流入，促進(jìn)酯化反應(yīng)，在促進(jìn)單核細(xì)胞分化為巨噬細(xì)胞，并向泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程中起著重要作用，因此可以

2、影響動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程，促進(jìn)冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟?。╟oronaryheart disease，CHD）的發(fā)生。流行病學(xué)研究顯示，冠心病是一種由多致病因素共同作用引起的疾病，是一個(gè)或多個(gè)致病基因的改變與后天環(huán)境以及各危險(xiǎn)因素相關(guān)作用的結(jié)果;由此推測(cè)ACAT1基因的突變以及酶含量和活性的改變可能與冠心病的發(fā)生關(guān)系密切。目前ACAT1基因啟動(dòng)子區(qū)域基因多態(tài)性及外顯子的錯(cuò)義突變與血脂、高血壓及冠心病的關(guān)系研究相對(duì)缺乏。
　　目的:AC

3、AT1基因單核苷酸多態(tài)性(SNP)是基因變異最主要的方式;本研究查詢NCBI及UCSC數(shù)據(jù)庫(kù)中最小等位基因頻率(Minor AlleleFrequency，MAF)值，選擇ACAT1基因啟動(dòng)子區(qū)域及外顯子的錯(cuò)義突變中MAF最大的兩個(gè)位點(diǎn)(Rs11545566、Rs13306731)進(jìn)行研究，旨在了解中國(guó)漢族人群兩位點(diǎn)SNP的頻率分布特點(diǎn)，及其與血脂、冠心病的關(guān)系，為以后基因診斷和治療提供依據(jù)。
　　方法:選擇2014-06至201

4、4-11四川漢族人群232例為研究對(duì)象，其中正常對(duì)照組104例，冠心病組128例。所有患者均完善冠脈造影檢查，并依據(jù)冠脈造影檢查結(jié)果診斷冠心病。排除標(biāo)準(zhǔn):惡性腫瘤、糖尿病、嚴(yán)重肝腎功能損害、心肌病、心肌橋、惡性心律失常等。完善肝腎功能、血脂、血糖檢測(cè)，抽取靜脈血2-3ml后，使用DNA提取盒提取DNA，使用Perkin-Elmer Gene Amp PCR Systems進(jìn)行基因型檢測(cè)，再采用軟件分析統(tǒng)計(jì)學(xué)數(shù)據(jù)?；蛐皖l率的分布使用Ha

5、rdy-Weinberg平衡檢測(cè)，連續(xù)性資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)描述，分類資料采用頻數(shù)和構(gòu)成比進(jìn)行描述，連續(xù)性資料組間比較采用秩和檢驗(yàn)，分類資料組間比較則采用卡方檢驗(yàn)，各基因型對(duì)冠心病的易感性使用優(yōu)勢(shì)比和95％置信區(qū)間(95％CI)評(píng)估。定義本研究中所有的統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果P＜0.05時(shí)方具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　結(jié)果:1、我國(guó)四川地區(qū)漢族人ACAT1基因Rs11545566、Rs13306731位點(diǎn)全部檢測(cè)人群（x2=0.212，0.14

6、9，df=1，P=0.900，0.985）及男女性別組間(x2=0.04，0.258 vs0.969，3.554，df=1，P=0.841，0.611 vs0.325，0.059)基因型頻率分布符合Hardy-Weinberg平衡檢測(cè)，具有人群代表性。兩位點(diǎn)正常對(duì)照組等位基因頻率（x2=0.361，3.621，df=1，P=0.508，0.057）均符合Hardy-Weinberg平衡檢測(cè)，可認(rèn)為具有人群代表性。2、ACAT1基因Rs1

7、1545566位點(diǎn)及Rs13306731位點(diǎn)基因突變后等位基因頻率的改變與冠心病的發(fā)病機(jī)率不相關(guān)(P=0.492，0.597)，T基因攜帶者患CHD的風(fēng)險(xiǎn)與非T基因攜帶者相比較無(wú)顯著差異(Odds Ratio=1.1377，95％CI=[0.787～1.644]);G基因攜帶者患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)與非G基因攜帶者相比較無(wú)顯著差異(Odds Ratio=1.114,95％CI=[0.747～1.663])。3、Rs11545566 SNP位點(diǎn)各

8、基因型的頻率分布比較無(wú)明顯差異（P=0.895）;Rs13306731 SNP位點(diǎn)各基因型的頻率分布比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);Rs11545566 SNP位點(diǎn)基因分布構(gòu)成比的組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.997，P=0.608)，Rs13306731 SNP位點(diǎn)基因分布構(gòu)成比的組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=11.647，P=0.003）。4、男女組間兩SNP位點(diǎn)的等位基因頻率分布差異不顯著（P=0.720，0.9

9、94），T基因攜帶者患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)與非T基因攜帶者相比較無(wú)顯著差異(Odds Ratio=0.933，95％ CI=[0.640～1.361]);G基因攜帶者患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)與非G基因攜帶者相比較無(wú)顯著差異(OddsRatio=0.998，95％CI=[0.662～1.506]);各基因型的頻率分布差異不顯著(P=0.611，0.107);正常對(duì)照組與冠心病組間比較，兩位點(diǎn)SNP的基因型別差異均不顯著，所有P值均大于0.05。正常對(duì)照組與

10、冠心病組間是否吸煙、是否飲酒在各基因型中的頻率分布也無(wú)差異（所有P＞0.05）。5、正常對(duì)照組、冠心病組間Rs11545566位點(diǎn)基因多態(tài)性的改變與血脂水平及載脂蛋白水平均無(wú)相關(guān)性（所有P＞0.05）;Rs13306731位點(diǎn)基因多態(tài)性與血脂水平無(wú)明顯相關(guān)性（所有P＞0.05），與載脂蛋白A-I、載脂蛋白B水平密切相關(guān)(P=0.009，0.041)。6、HDL-C水平＞1mmol/L組中，Rs11545566位點(diǎn)基因突變后等位基因及各基

11、因型頻率的改變與冠心病的發(fā)病機(jī)率不相關(guān)(P=0.578，0.576);T基因攜帶者患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)與非T基因攜帶者相比較無(wú)顯著差異（Odds Ratio=0.875，95％ CI=[0.547～1.398]; Rs13306731位點(diǎn)基因突變后等位基因頻率的改變與冠心病的發(fā)病機(jī)率不相關(guān)(P=0.330)，G基因攜帶者患CHD的風(fēng)險(xiǎn)與非G基因攜帶者相比較無(wú)顯著差異(Odds Ratio=1.293，95％CI=[0.770～2.171]);

12、但Rs13306731位點(diǎn)GG基因型的改變?cè)黾恿祟净脊谛牟〉臋C(jī)率（P=0.012）;低HDL-C水平組(HDL-C≤1 mmol/L)，Rs11545566位點(diǎn)基因突變后等位基因頻率的改變與冠心病的發(fā)病機(jī)率不相關(guān)(P=0.093，0.144);T基因攜帶者患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)與非T基因攜帶者相比較無(wú)顯著差異(Odds Ratio=1.744，95％CI=[0.909～3.347]; Rs13306731位點(diǎn)基因突變后等位基因頻率的改變與冠心病

13、的發(fā)病機(jī)率不相關(guān)(P=0.380，0.565);G基因攜帶者患冠心病的風(fēng)險(xiǎn)與非G基因攜帶者相比較無(wú)顯著差異(Odds Ratio=0.727，95％CI=[0.357～1.483])。7、冠心病不合并高血壓組與冠心病合并高血壓組兩組間Rs11545566、Rs13306731基因多態(tài)性各等位基因頻率分布無(wú)明顯差異(P=0.912，0.440);兩組間Rs11545566、Rs13306731基因多態(tài)性各基因型的頻率分布亦無(wú)明顯差異(P=

14、0.945，0.193)。8、穩(wěn)定性心絞痛組與急性冠脈綜合征組兩組間Rs11545566、Rs13306731基因多態(tài)性各等位基因頻率分布無(wú)明顯差異(P=0.233，0.707)，兩組間Rs11545566、Rs13306731基因多態(tài)性各基因型的頻率分布亦無(wú)明顯差異(P=0.481，0.927)。
　　結(jié)論:1、本研究揭示了ACAT1基因Rs11545566、Rs13306731位點(diǎn)的基因多態(tài)性改變?cè)跐h族人群中的頻率分布情況。2