雜色鮑sod、cat和mpeg基因的克隆與分析.pdf

1、本研究利用RT-PCR技術和RACE方法克隆了雜色鮑抗氧化防御系統(tǒng)相關基因sod、cat和抗病相關基因mpeg及內(nèi)參標基因28S rRNA。進而用實時定量PCR技術分析了sod、cat和mpeg基因在病原菌感染和污染物暴露下的表達譜。結果表明： (1)sod基因組DNA全長含有5個外顯子，4個內(nèi)含子，第一個和第四個內(nèi)含子遵循GT-AG規(guī)則。Sod基因cDNA序列全長984 bp，5’UTR為5bp，ORF為465 bp，3’UTR

2、為514bp，可編碼154個氨基酸。同源性分析表明該序列與其它貝類sod基因具有很高的相似性。進化分析顯示，雜色鮑sod基因與其它軟體動物sod基因占據(jù)進化上獨立的分支，而魚類、哺乳動物各集成一支。定量PCR分析發(fā)現(xiàn)，在副溶血弧菌感染后的第8h、24h、48h和96h時相，sod基因表達水平?jīng)]有顯著差異；在TBT暴露下的第2h、12h、48h和192h時相中，只有在12h時相，雜色鮑肝胰腺的sod基因表達水平顯著低于與對照組，其余時相未

3、見變化。 (2)獲得了2312 bp cat基因的cDNA 部分片段。雜色鮑感染副溶血弧菌后,肝胰腺中cat基因表達水平在第24h顯著低于對照組，在TBT暴露下，肝胰腺中的cat基因表達水平在第2h顯著低于對照組。 (3)免疫相關基因mpeg，cDNA全長2781bp，5’UTR為252bp，ORF為2187bp，3’UTR為342bp，編碼728個氨基酸。同源性分析表明，其與粉鮑、紅鮑的mpeg基因具有很高的相似性。進化分