雜色鮑三個免疫相關(guān)基因的克隆及表達(dá)分析.pdf

1、雜色鮑(Haliotis diversicolor)是我國南方海域水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中重要的經(jīng)濟(jì)貝類之一,但自從上世紀(jì)90年代以來,養(yǎng)殖雜色鮑陸續(xù)暴發(fā)大規(guī)模病害,成活率急劇下降,給養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失,嚴(yán)重影響了雜色鮑養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。引起雜色鮑大規(guī)模死亡的原因是多方面的,最主要的是養(yǎng)殖環(huán)境惡化、雜色鮑種質(zhì)衰退以及抗病力下降。遺傳改良和培育抗病優(yōu)良品種、開發(fā)免疫增強(qiáng)劑等是解決目前雜色鮑養(yǎng)殖業(yè)面臨病害問題的必然選擇,而所有這些措施的基

2、礎(chǔ)都有賴于對雜色鮑免疫防御機(jī)制有深刻的了解。本研究對雜色鮑天然免疫系統(tǒng)中3個重要的功能基因進(jìn)行克隆及表達(dá)分析,旨在為深入了解鮑免疫防御分子機(jī)制提供新資料。本研究的主要結(jié)果如下:
　　 1.克隆獲得了GABAA受體相關(guān)蛋白(GABAA receptor-associated protein,GABARAP)、表皮生長因子受體(Epidermal growth factor receptor,EGFR)和功能未預(yù)測受體(unpred

3、icted receptor,UPR)3個基因的全長cDNA,分別命名為SaGABARAP、SaEGFR和SaUPR。SaGABARAP基因cDNA全長為963bp,354bp的ORF編碼117個氨基酸,有一個自吞噬蛋白Atg8結(jié)構(gòu)域。SaEGFR基因cDNA全長為2620bp,2373bp的ORF編碼790個氨基酸,有兩個EGF受體L結(jié)構(gòu)域。SaUPR基因cDNA全長為1779bp,1641bp的ORF編碼546個氨基酸,有一個清道夫

4、受體半胱氨酸豐富結(jié)構(gòu)域、兩個表皮生長因子結(jié)構(gòu)域和一個透明帶結(jié)構(gòu)域,推測可能是個膜受體。
　　 2.克隆獲得了SaGABARAP和SaUPR兩個基因的基因組DNA。SaGABARAP基因組DNA全長為4352bp,包含3個外顯子和2個內(nèi)含子。SaUPR基因組DNA全長為7517bp,包含7個外顯子和6內(nèi)含子。
　　 3.揭示了SaGABARAP、SaEGFR和SaUPR在雜色鮑各組織和胚胎幼體發(fā)育時期的表達(dá)情況。這三個基因

5、在檢測的各組織和胚胎幼體發(fā)育時期均有表達(dá),而且都在肝胰臟中表達(dá)水平最高,SaGABARAP在原腸胚中的表達(dá)水平最高,SaEGFR和SaUPR在囊胚中的表達(dá)水平最高。所有這些暗示著這三個基因可能在雜色鮑生命過程中發(fā)揮著廣泛而重要的作用。
　　 4.揭示了雜色鮑在溶藻弧菌感染后血細(xì)胞和肝胰臟中三個基因的表達(dá)情況?；【腥竞?SaGABARAP基因在血細(xì)胞和肝胰臟中的表達(dá)量均發(fā)生顯著提高,SaEGFR基因在血細(xì)胞和肝胰臟中的表達(dá)水平均