肺再血管化修復煙熏大鼠肺氣腫模型的實驗研究.pdf

1、肺氣腫是一種嚴重威脅人類健康的常見病，被認為一旦發(fā)生則是持續(xù)永久不可逆而難以修復的。目前尚無有效的方法控制肺氣腫病變的進展，故臨床只有對癥而無減輕肺氣腫病理改變的治療方法。在多年肺減容手術和支氣管腔內栓堵治療肺氣腫的研究基礎上，李寶平教授提出肺毛細血管損傷可能參與肺氣腫發(fā)病機制的新假設：有害因素損傷肺泡毛細血管，致肺毛細血管床減少，肺血流量減少，肺通氣/血流比值增大，機體為使通氣/血流比值得以重新匹配，代償性地出現(xiàn)肺泡融合以減少肺泡彌散

2、面積，參與產生肺氣腫的病理改變。根據上述假設，若能促進肺泡毛細血管的再生，亦即肺的再血管化，肺氣腫的病理改變在一定程度上是可以修復的。 目的： 本實驗利用煙熏加氣管內滴注彈性蛋白酶制作大鼠肺氣腫模型，使用bFGF、VEGF、MSCs促進肺毛細血管再生，驗證我們的假設并探索其可能的機制；本研究將完善肺氣腫的發(fā)病理論，為治療肺氣腫提供新的思路和理論依據，并為臨床應用提供實驗基礎。 方法： 第一部分采用健康8周

3、齡Wistar大鼠16只，體重180～200g，雌雄不限，隨機分為2組，每組8只，模型組(A組)和對照組(B組)，A組煙熏加氣管內一次性滴入豬胰彈性蛋白酶(Porcine pancreatic elastase，PPE)方法誘發(fā)大鼠肺氣腫，B組氣管內滴入生理鹽水作為對照，3個月后，通過動脈血氣分析、肺泡形態(tài)學觀察，肺毛細血管測定等確認肺氣腫是否復制成功，并對大鼠肺氣腫動物模型進行評價。 第二部分采用健康8周齡Wistar大鼠48

4、只，體重180～200g，隨機分為6組，每組8只，分別為bFGF組(A組)、VEGF組(B組)、MSCs組(C組)、VEGF+MSCs組(D組)、對照組(E組)和健康對照組(F組)。A、B、C、D和E組采用煙熏加氣管內滴入PPE，F(xiàn)組大鼠滴入生理鹽水，3個月后模型復制成功。A、B組大鼠氣管內分別滴入bFGF(400U/只)、VEGF(2ug/只)，每周1次，共3次。C組大鼠經尾靜脈注入MSCs懸液0.5ml，濃度4.0x106，D組大鼠

5、氣管內滴入VEGF 2ug/只(3次)并且尾靜脈注入MSCs(1次)，E、F組大鼠給與生理鹽水，4周后大鼠測體重，行動脈血氣分析，觀察肺泡形態(tài)學變化，免疫組化法檢測肺組織肺毛細血管的變化。 結果： 1.大鼠經煙熏加氣管內滴入PPE，3個月后，病理學觀察出現(xiàn)慢性阻塞性肺氣腫的病理學表現(xiàn)，免疫組織化學檢測肺毛細血管數(shù)明顯減少(P<0.05)。 2.bFGF、VEGF和MSCs均能促進肺毛細血管的再生。治療組均觀察到了

6、平均肺泡數(shù)明顯增加(P<0.05)、平均肺泡間隔和平均肺泡面積明顯減小(P<0.05)，免疫組織化學檢測毛細血管數(shù)明顯增加(P<0.05)，肺氣腫病理學改善；動脈血氣分析：VEGF組動脈氧分壓高與對照組(P<0.05)，其余組動脈氧分壓高與對照組(但P>0.05)。 3.經尾靜脈注入的MSCs定居到了肺組織內。 結論： 1.bFGF、VEGF和MSCs能在一定程度上修復煙熏加氣管內滴入彈性蛋白酶構建的大鼠肺氣腫模